超声与分子生物学
关键词:
超声越来越多地应用于医学和生物学的实践中;分子生物学已经渗入到生命科学的各领域,超声与分子生物学的结合日趋明显,包括超声在分子生物学研究和实践中的应用和超声生物学效应及其应用中的分子生物学。
1、超声在分子生物学研究中的应用
利用超声可损伤DNA的原理,超声在分子生物学研究中已成为有力的工具。建立基因文库时常用限制性内切酶切割基因组DNA,但在多糖存在和/或DNA甲基化时,内切酶往往难以完全消化。Kawata采用超声切割基因组DNA建立基因文库,效果满意〔1〕 。采用不同的声处理条件,可控制DNA片段的大小。Lamoureux则采用超声切割的基因组DNA行分子杂交〔2〕 。超声也可用于从石蜡包埋的组织块中分离RNA,以进行进一步研究。
超声可提高细胞膜通透性,故可利用超声将目的基因片段导入受体细胞。Wyber报告2.0W/cm2 、20KHz超声辐照30秒使质粒进入酵母为对照的20倍〔3〕 ,Kim采用超声将β-半乳糖苷酶基因导入鼠成纤维细胞和软骨细胞〔4〕 ,并报告了这种转化的最适条件,使用连续波,二种细胞转化率分别为0.34%和2.4%,其转化效率并不理想。Tata以前列腺癌细胞为受体细胞,发现激素敏感细胞LnCap和不敏感细胞PC-3对超声基因转化和基因表达的反应性不同〔5〕 ......
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