人类OPRM1-EXON1的克隆与探针的制备
顾珊智. 刘清波. 李生斌.
西安交通大学医学院法医系;教育部环境与疾病相关基因重点实验室. 西安交通大学医学院法医系;教育部环境与疾病相关基因重点实验室 陕西西安710061 .
【关键词】
μ1-阿片受体. 外显子1. 克隆. 序列测定. 探针.
【发表年期页】
2005,1; 29
【摘要】
目的克隆、测序人类OPRM1-EXON1,并用非同位素生物素标记法对该基因进行标记、制备探针,用于OPRM1-EXON1的表达及功能研究。方法通过PCR法扩增目的基因片段,并将其连接到pGEM-T载体上,转入感受态细胞中进行重组并克隆,经酶切和基因测序进行鉴定,用非同位素生物素标记法进行探针的标记与制备。结果经过PCR扩增的目的基因片段大小(2.2kb)与理论上片段大小一致,经过测序证实其序列与NCBI提供的序列相同,用此片段成功的制备了用于研究阿片受体基因的探针。结论从基因组中成功克隆了人类OPRM1-EXON1,并制备了探针,为深入研究吗啡依赖相关基因及基因表达创造了必要的条件。, http://www.100md.com( 顾珊智. 刘清波. 李生斌. )
西安交通大学医学院法医系;教育部环境与疾病相关基因重点实验室. 西安交通大学医学院法医系;教育部环境与疾病相关基因重点实验室 陕西西安710061 .
【关键词】
μ1-阿片受体. 外显子1. 克隆. 序列测定. 探针.
【发表年期页】
2005,1; 29
【摘要】
目的克隆、测序人类OPRM1-EXON1,并用非同位素生物素标记法对该基因进行标记、制备探针,用于OPRM1-EXON1的表达及功能研究。方法通过PCR法扩增目的基因片段,并将其连接到pGEM-T载体上,转入感受态细胞中进行重组并克隆,经酶切和基因测序进行鉴定,用非同位素生物素标记法进行探针的标记与制备。结果经过PCR扩增的目的基因片段大小(2.2kb)与理论上片段大小一致,经过测序证实其序列与NCBI提供的序列相同,用此片段成功的制备了用于研究阿片受体基因的探针。结论从基因组中成功克隆了人类OPRM1-EXON1,并制备了探针,为深入研究吗啡依赖相关基因及基因表达创造了必要的条件。, http://www.100md.com( 顾珊智. 刘清波. 李生斌. )