反义HSP70真核表达载体的构建和在人喉癌细胞的表达
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王晓侠. 李胜利. 付员根. 姚小宝.
热休克蛋白70.真核表达载体.构建.喉癌.表达.
参见附件(145kb)。
王晓侠. 李胜利. 付员根. 姚小宝. 刘晖. 宁小萱. 刘志国. 朱宏亮. 樊代明.
西安交通大学第二医院院耳鼻喉科. 汕头大学医学院生化与分子生物学教研室. 西京医院消化病研究所. 西安交通大学第一医院耳鼻喉科. 西京医院消化病研究所 西安.
【关键词】
热休克蛋白70. 真核表达载体. 构建. 喉癌. 表达.
【发表年期页】
2002,4; 0
【摘要】
目的 进行促凋亡治疗喉癌实验 ,构建和鉴定携带反义HSP70 (heatshockprotein 70 )基因的真核表达载体。方法 将HSP70cDNA反向克隆入 pcDNA 3.1,构建CMV启动子控制的真核表达载体 pcDNA AHSP70 ,用酶切鉴定结果 ;应用该载体转染人喉表皮样癌细胞Hep 2 ,G4 18筛选阳性克隆 ;westernblot和免疫组化检测转染前后瘤细胞的HSP70的表达。检测转染前后瘤细胞的生物学性状。结果 获得 pcDNA AHSP70真核表达载体 ,HSP70反义RNA阻断了Hep 2细胞的HSP70的表达 ,经westernblotting和免疫组化证实 ,实验组瘤细胞不能表达或低表达HSP70 ,而对照和空载体组高表达HSP7
王晓侠. 李胜利. 付员根. 姚小宝. 刘晖. 宁小萱. 刘志国. 朱宏亮. 樊代明.
西安交通大学第二医院院耳鼻喉科. 汕头大学医学院生化与分子生物学教研室. 西京医院消化病研究所. 西安交通大学第一医院耳鼻喉科. 西京医院消化病研究所 西安.
【关键词】
热休克蛋白70. 真核表达载体. 构建. 喉癌. 表达.
【发表年期页】
2002,4; 0
【摘要】
目的 进行促凋亡治疗喉癌实验 ,构建和鉴定携带反义HSP70 (heatshockprotein 70 )基因的真核表达载体。方法 将HSP70cDNA反向克隆入 pcDNA 3.1,构建CMV启动子控制的真核表达载体 pcDNA AHSP70 ,用酶切鉴定结果 ;应用该载体转染人喉表皮样癌细胞Hep 2 ,G4 18筛选阳性克隆 ;westernblot和免疫组化检测转染前后瘤细胞的HSP70的表达。检测转染前后瘤细胞的生物学性状。结果 获得 pcDNA AHSP70真核表达载体 ,HSP70反义RNA阻断了Hep 2细胞的HSP70的表达 ,经westernblotting和免疫组化证实 ,实验组瘤细胞不能表达或低表达HSP70 ,而对照和空载体组高表达HSP7
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