Graves病自身免疫单链抗体库的构建及抗甲状腺单抗的筛选
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侯秉璋. 陈昆明. 乔铃. 赵禹. 刘嘉玉. 张墨玲.
参见附件(65kb)。
侯秉璋. 陈昆明. 乔铃. 赵禹. 刘嘉玉. 张墨玲.
天津医科大学内分泌研究所. 天津医科大学内分泌研究所 天津300070
【关键词】
【发表年期页】
2003,2; 184
【摘要】
目的 Graves病属于甲状腺自身免疫性疾病 (AITD) ,其患者血中存在多种抗甲状腺自身抗体 ,其中包括TGAb、TPOAb以及TRAb。单链抗体 (ScFv)是以连接肽将重链可变区基因 (VH)和轻链可变区基因 (VL)连接起来形成的单链小分子抗体。为了获得人源性抗甲状腺抗体 ,分析其基因结构 ,进一步研究AITD的发病机理 ,我们构建了人源性噬菌体ScFv库。方法 采取Graves病人静脉血 ,用淋巴细胞分层液按常规分离单个核细胞。提取淋巴细胞总RNA逆转录合成cDNA。分别扩增出全套的免疫球蛋白VL 链和VH 链基因 ,利用重叠PCR方法 ,构建ScFv基因。重组到 p3SCMH嗜菌粒中 ,电穿
侯秉璋. 陈昆明. 乔铃. 赵禹. 刘嘉玉. 张墨玲.
天津医科大学内分泌研究所. 天津医科大学内分泌研究所 天津300070
【关键词】
【发表年期页】
2003,2; 184
【摘要】
目的 Graves病属于甲状腺自身免疫性疾病 (AITD) ,其患者血中存在多种抗甲状腺自身抗体 ,其中包括TGAb、TPOAb以及TRAb。单链抗体 (ScFv)是以连接肽将重链可变区基因 (VH)和轻链可变区基因 (VL)连接起来形成的单链小分子抗体。为了获得人源性抗甲状腺抗体 ,分析其基因结构 ,进一步研究AITD的发病机理 ,我们构建了人源性噬菌体ScFv库。方法 采取Graves病人静脉血 ,用淋巴细胞分层液按常规分离单个核细胞。提取淋巴细胞总RNA逆转录合成cDNA。分别扩增出全套的免疫球蛋白VL 链和VH 链基因 ,利用重叠PCR方法 ,构建ScFv基因。重组到 p3SCMH嗜菌粒中 ,电穿
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