人促甲状腺激素受体胞外段的体外重组、蛋白高效表达及其与构象功能的关系
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吴晓燕. 雒文田. 徐利. 王琛. 田竹芳.
TSH受体(TSHR).基因重组.空间构象.自身免疫性甲状腺病.
参见附件(67kb)。
吴晓燕. 雒文田. 徐利. 王琛. 田竹芳.
西安交通大学第一医院内分泌科. 西安交通大学第一医院内分泌科 陕西西安710061 .
【关键词】
TSH受体(TSHR). 基因重组. 空间构象. 自身免疫性甲状腺病.
【发表年期页】
2003,2; 181
【摘要】
目的 TSH受体 (TSHR)是诱发自身免疫性甲状腺病 (autoimmunethyroiddisease ,AITD)的主要自身抗原。TSHR上TSH结合部位、自身抗体及主要的B细胞、T细胞表位均位于其胞外段部分。本研究利用基因重组方法 ,建立人TSH受体胞外段 (hTSHRecd)体外高效表达、纯化系统 ,用于Graves’病的临床及实验研究 ,探索体外表达的重组hTSHRecd蛋白的免疫生物活性与其空间构象的关系。方法 设计 1对hTSHRecd特异性引物 ,自PCRTTM3 hTSHR载体中PCR扩增合成hTSHRecd片段 ,经限制性内切酶BamHⅠ、SalⅠ消化 ,胶回收纯化后 ,重新构建于表达质粒 pQE 30中。用质粒电泳、限制
吴晓燕. 雒文田. 徐利. 王琛. 田竹芳.
西安交通大学第一医院内分泌科. 西安交通大学第一医院内分泌科 陕西西安710061 .
【关键词】
TSH受体(TSHR). 基因重组. 空间构象. 自身免疫性甲状腺病.
【发表年期页】
2003,2; 181
【摘要】
目的 TSH受体 (TSHR)是诱发自身免疫性甲状腺病 (autoimmunethyroiddisease ,AITD)的主要自身抗原。TSHR上TSH结合部位、自身抗体及主要的B细胞、T细胞表位均位于其胞外段部分。本研究利用基因重组方法 ,建立人TSH受体胞外段 (hTSHRecd)体外高效表达、纯化系统 ,用于Graves’病的临床及实验研究 ,探索体外表达的重组hTSHRecd蛋白的免疫生物活性与其空间构象的关系。方法 设计 1对hTSHRecd特异性引物 ,自PCRTTM3 hTSHR载体中PCR扩增合成hTSHRecd片段 ,经限制性内切酶BamHⅠ、SalⅠ消化 ,胶回收纯化后 ,重新构建于表达质粒 pQE 30中。用质粒电泳、限制
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