人脾脏巨噬细胞的分离与纯化
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闫峰. 李宗芳. 张澍. 杨建辉. 李爱民. 刘效恭
脾脏.巨噬细胞.贴壁培养.分离方法.
参见附件(168kb)。
闫峰. 李宗芳. 张澍. 杨建辉. 李爱民. 刘效恭
西安交通大学第二医院普外科. 西安交通大学第二医院普外科 陕西西安710004 .
【关键词】
脾脏. 巨噬细胞. 贴壁培养. 分离方法.
【发表年期页】
2004,5; 513-516
【摘要】
目的 探索分离纯化大量人脾脏巨噬细胞(MΦ)的方法。方法 选取10例手术切除的脾脏,机械研磨法获得脾脏组织细胞混悬液。采用贴壁培养的方法进行MΦ的分离与纯化,相差显微镜下动态观察,明确贴壁培养的合适时间,详细记录MΦ分离纯化过程各步骤所需时间。收获的MΦ,台盼蓝染色判定活力并计数,统计出平均每克脾脏组织收获的MΦ数及其纯度。相差显微镜、透射电镜观察分离纯化MΦ的形态特征。结果 分析贴壁培养各时间段的细胞纯度及活力,确定MΦ培养的合适时间为2～3h。贴壁培养纯化后,平均从每克脾脏组织可收获(0 .2 5±0 .0 3)×10 8个MΦ,纯度为(90±5
闫峰. 李宗芳. 张澍. 杨建辉. 李爱民. 刘效恭
西安交通大学第二医院普外科. 西安交通大学第二医院普外科 陕西西安710004 .
【关键词】
脾脏. 巨噬细胞. 贴壁培养. 分离方法.
【发表年期页】
2004,5; 513-516
【摘要】
目的 探索分离纯化大量人脾脏巨噬细胞(MΦ)的方法。方法 选取10例手术切除的脾脏,机械研磨法获得脾脏组织细胞混悬液。采用贴壁培养的方法进行MΦ的分离与纯化,相差显微镜下动态观察,明确贴壁培养的合适时间,详细记录MΦ分离纯化过程各步骤所需时间。收获的MΦ,台盼蓝染色判定活力并计数,统计出平均每克脾脏组织收获的MΦ数及其纯度。相差显微镜、透射电镜观察分离纯化MΦ的形态特征。结果 分析贴壁培养各时间段的细胞纯度及活力,确定MΦ培养的合适时间为2～3h。贴壁培养纯化后,平均从每克脾脏组织可收获(0 .2 5±0 .0 3)×10 8个MΦ,纯度为(90±5
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