突变型人肿瘤坏死因子-α工程菌发酵培养的实验研究
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孔令洪. 李瑶琛. 王一理. 尚宁宽.
突变型471rhTNF-α.发酵培养.工程菌.
参见附件(120kb)。
孔令洪. 李瑶琛. 王一理. 尚宁宽. 耿宜萍. 司履生.
西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所. 西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所 陕西西安710061 .
【关键词】
突变型471 rhTNF-α. 发酵培养. 工程菌.
【发表年期页】
2003,3; 0
【摘要】
目的 优化基因重组人突变型4 71肿瘤坏死因子α(TNF α)工程菌的发酵和表达条件。方法 通过改变培养基的组分、pH值、培养温度和诱导表达的条件等,采用测定细菌生物量和蛋白表达量等方法,确定最适的发酵和表达条件,并考察工程菌中重组质粒的遗传稳定性。结果 突变型4 71rhTNF α工程菌在pH值7.5的SOC培养基中,30℃培养、4 2℃诱导5h时,其表达量最大。而且,所构建的重组质粒在工程菌DH5α中传代稳定,目的蛋白的表达不受影响。结论 优化了基因重组人突变型4 71rhTNF α工程菌的发酵和表达的最适条件,为进一步开发人突变型4 71rhTNF α奠定了基础
孔令洪. 李瑶琛. 王一理. 尚宁宽. 耿宜萍. 司履生.
西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所. 西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所 陕西西安710061 .
【关键词】
突变型471 rhTNF-α. 发酵培养. 工程菌.
【发表年期页】
2003,3; 0
【摘要】
目的 优化基因重组人突变型4 71肿瘤坏死因子α(TNF α)工程菌的发酵和表达条件。方法 通过改变培养基的组分、pH值、培养温度和诱导表达的条件等,采用测定细菌生物量和蛋白表达量等方法,确定最适的发酵和表达条件,并考察工程菌中重组质粒的遗传稳定性。结果 突变型4 71rhTNF α工程菌在pH值7.5的SOC培养基中,30℃培养、4 2℃诱导5h时,其表达量最大。而且,所构建的重组质粒在工程菌DH5α中传代稳定,目的蛋白的表达不受影响。结论 优化了基因重组人突变型4 71rhTNF α工程菌的发酵和表达的最适条件,为进一步开发人突变型4 71rhTNF α奠定了基础
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