研究报告

    液相色谱2质谱联用方法用于

    严重急性呼吸系统综合症冠状病毒结构蛋白质的研究

    张养军 王京兰 蔡 耘 应万涛 郝运伟 李 蕾

    李晓海 戴舒佳 代景泉 贺福初 钱小红3

    (军事医学科学院放射医学研究所,北京100850)

    王 杰 魏开华

    (军事医学科学院仪器测试分析中心, 北京100850)

    摘 要 通过高效液相反相色谱、毛细管反相色谱- 串联质谱联用方法对SARS 病毒攻击细胞的研究,鉴定

    出了N、S 和M 3 种SARS 结构蛋白质,并准确测定了N 蛋白质的分子量。由分子量结果和生物信息学推断的

    N 蛋白质的理论分子量比较,可以确定N 蛋白质不存在常见的磷酸化修饰和糖基化修饰或含量很低。进一步

    的研究表明:N 蛋白质可能存在降解现象,其降解机理尚需探索。另外,通过对样品直接酶切后进行两维毛细

    管分离和串联质谱鉴定与对样品先进行分离,然后再进行毛细管反相分离2串联质谱鉴定方法比较,表明两种

    方法在蛋白质组学研究中各具优缺点,可根据不同目的选择使用。

    关键词 蛋白质组,高效液相色谱,生物质谱,严重急性呼吸系统综合症

    2003207208 收稿;2003209222 接受

    本文系国家重点基础研究发展规划项目(No. 2001CB510201) 、国家自然科学基金(No. 20275046) 和国家高技术项目(No. 2001AA233031 ,No. 22022BA711A11) 资助课题

    1 引 言

    自从2002 年11 月在我国广东首次发生SARS( severe acute respiratory syndrome) 以来,已经有许多国

    家和地区的人民生命安全受到这种病毒的威胁。尽管在WHO 的组织和协调下,经过多国科学家的努

    力,探明这种疾病为一种变异的冠状病毒所致1 ,并相继有加拿大、美国和中国的科学家2 ～4 测定了该

    病毒的基因序列,但由于基因序列到蛋白质表达要经过转录和翻译过程,并存在剪切和修饰,所以,要从

    基因水平准确预测蛋白质的结构和功能存在困难。因此,人们至今仍不清楚该病毒的致病机制及传播

    途径。有效的预防疫苗和治疗药物还未研制出。因此,有必要对SARS 病毒的蛋白质组进行研究。目

    前,已有加拿大的Stangding5 研究小组表征了N 蛋白质和S 蛋白质的一些特征,但由于所用方法的局限 ......