两种细菌的毛细管电泳分离及其与药物相互作用的研究

    肖尚友1, 2 阴永光2 宋广涛2, 3 杨元娟2, 4 夏之宁

    3 1, 2

    1 (重庆大学生物力学与组织工程教育部重点实验室, 重庆400044) 2 (重庆大学化学化工学院,重庆400044)

    3 (中国科学院长春应用化学研究所,长春130022) 4 (重庆市药剂学校,重庆400030)

    摘 要 通过对大肠杆菌与金黄色葡萄球菌的毛细管电泳行为的研究,包括对细菌样品预处理、缓冲液、检测

    波长以及聚合物添加剂对分离度的改进等的考察,在优化的实验条件下,实现了大肠杆菌与金黄色葡萄球菌

    的快速分离,从而建立一种新的细菌辅助识别与定性的补充方法。将抗菌药物阿奇霉素与金黄色葡萄球菌混

    合培育,发现由于阿奇霉素抑制细菌表面蛋白合成,造成与金黄色葡萄球菌作用后,细菌表面电荷密度降低,表现为阿奇霉素对金黄色葡萄球菌的电泳淌度的影响,而且培育时间与金黄色葡萄球菌的淌度线性相关。

    关键词 细菌, 毛细管电泳, 大肠杆菌, 金黄色葡萄球菌, 阿奇霉素

    2004205224收稿; 2005202205接受

    本文系国家自然科学基金(No. 20175038, 20375051)及教育部跨世纪优秀人才培养计划(教技函[ 2001 ]3号)资助项目

    1 引 言

    细菌是单细胞原核微生物,了解与控制细菌的各种活动,对各种细菌进行识别和性质研究是微生物

    科学的研究基础。然而往往多种细菌共存于同一环境体系之中,所以发展快速、高效的细菌分离识别分

    析方法十分重要。目前,仍缺乏对各种细菌进行快速高效分离分析的方法。基于细菌形态识别的技术

    仍占据着主要地位。近年来,根据其物理化学特性研究细菌的方法有质谱法[ 1 ] 、电化学法[ 2 ] 、色谱

    法[ 3, 4 ] 、离子淌度谱法[ 5 ]及光谱法[ 6, 7 ]等。这些方法具有快速和定量准确的特点。电泳作为一种分离手

    段早已用于细菌的分离与性质研究[ 8 ] 。

    细菌的细胞壁含有蛋白质、唾液酸等,在一定pH的水溶液中离解而带一定的电荷。细菌表面的荷

    电情况与溶液的组成、pH、离子强度、温度等因素相关。细菌的类型、生长阶段及生长条件不同,其表面

    的聚合物组成也不同,因此表现为其电泳淌度和等电点存在差异。这是利用电泳淌度或等电点的不同

    对细菌进行分离和表征的基础[ 9, 10 ] ......