毛细管电泳2电化学检测法

    测定血浆中水溶性小分子抗氧化剂

    王清江 陈 相 丁 飞 吕 金 何品刚 方禹之

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    (华东师范大学化学系,上海200062)

    摘 要 应用毛细管电泳2电化学检测方法,以金属铜电极为检测电极,研究了同时测定人血浆中水溶性小分

    子抗氧化剂谷胱甘肽(GSH) 、尿酸(UA) 、色氨酸( Try)和半胱氨酸(Cys)的最佳条件。在最佳实验条件下,各

    组分的线性范围在1. 0 ×10 - 6 ～5. 0 ×10 - 4 mol/L内;检出限在10 - 6 mol/L数量级。该法具有分析速度快、灵

    敏度高等优点,对血浆样品的测定取得了满意的结果。

    关键词 抗氧化剂,毛细管电泳,电化学检测,铜电极

    2004205217收稿; 2005201204接受

    本文系上海市科委自然科学基础研究基金资助项目(No. 04ZR14041)

    1 引 言

    人体抗氧化系统的基础是各种抗氧化剂,包括抗氧化酶、脂溶性抗氧化剂、水溶性小分子抗氧化剂和

    蛋白性抗氧化剂等。准确检测体内各种抗氧化剂的,对相关疾病的诊断和药物的开发具有重要的意义。

    人体内的水溶性小分子抗氧化剂包括抗坏血酸(Vc)、谷胱甘肽(GSH)、尿酸(UA)、色氨酸(Try)和半胱氨

    酸(Cys)等。除抗坏血酸主要通过食物摄入外,其它几种都是体内的代谢产物。这些小分子抗氧化剂的分

    析主要以高效液相色谱2紫外/电化学检测联用为主,其中电化学检测比紫外检测的灵敏度更高[ 1, 2 ] 。

    近十几年来,毛细管电泳由于具有分离效率高、试样用量小、仪器简单等优势而在许多分析领域中

    得到广泛的应用[ 3 ] 。电化学检测因具有灵敏度比通常使用的紫外检测高、仪器费用低廉等优点而成为

    一种重要的毛细管电泳检测方法[ 4, 5 ] 。Wang等[ 6 ]用毛细管电泳2双电极电化学检测测定了Cys、UA、Vc

    和GSH;杨晓云等[ 7 ]应用高效液相色谱2电化学检测法测定了半胱氨酸、色氨酸和酪氨酸,选用铂电极为

    工作电极。本实验首次以金属铜电极为检测电极,利用毛细管区带电泳2安培检测联用同时测定了人血

    浆中通过代谢产生的小分子抗氧化剂GSH、UA和Cys。

    2 实验部分

    2. 1 仪器与试剂

    自行组装的毛细管电泳2安培检测系统[ 8 ] ;熔融石英毛细管( 45 cm ×25μm, i. d. , 360μm o. d. ,Polymicro Technologies, USA) ; CH22型毛细管电泳电化学检测仪(江苏电分析仪器厂) ; CH I630电化学 ......