第32 卷

    2004 年9 月

    分析化学(FENXI HUAXUE) 研究简报

    Chinese Journal of Analytical Chemistry

    第9 期

    1219～1222

    反相高效液相色谱/ 电喷雾质谱法分析化学合成七肽粗产物

    王贤纯 梁宋平

    3

    (湖南师范大学生命科学学院,长沙410081)

    摘 要 利用RP2HPLC/ ESI2MS 直接分析用芴甲氧羰基(Fmoc) 固相多肽合成方法在PHB 树脂上偶联合成的

    一个七肽(H2N2Tyr2Val2Asn2Thr2Asn2Met2Gly2CO0H ,Mr 797. 3) 粗产物。RP2HPLC 显示合成粗产物含有1 个主成

    分,4 个次要成分和多个微量成分;与之联用的电喷雾质谱则同步准确地测定出各成分的分子量( m/ z) 并自

    动对各主要成分的化学结构进行了串联质谱分析。结果证明,粗产物中的主成分即为目标七肽,另外几个主

    要副产物为七肽的氧化产物或残缺肽。

    关键词 色谱2质谱,多肽,固相化学合成

    2003207217 收稿;2004204213 接受

    本文系国家自然科学基金(No. 39990600) 和湖南省自然科学基金(No. 01JJY2028) 资助项目

    1 引 言

    固相化学合成技术可以迅速有效地制备各种模式多肽和天然多肽的类似物,广泛用于蛋白质多肽

    的结构与功能研究和药理学研究等1 ,2 。然而,化学合成多肽时往往伴随有一系列副反应,不仅影响合

    成产物的纯度,而且还可能影响到目标产物的真实性,所以需要采用有效的方式对合成产物进行分离和

    鉴定,并对副反应机制进行探讨,为改进合成条件,减少副反应,提高合成产物纯度提供参考依据。

    上世纪末发展起来的基于“软”电离技术和碰撞诱导裂解(CID) 技术的生物质谱可以在pmol 水平对

    合成产物进行快捷的分子量测定和化学结构分析3 ,与高效液相色谱技术联用后更加有力地推动了化

    学合成多肽的鉴定和副反应机理的研究。到目前为止,已有包括氧化、酰化和异常断裂在内的多种副反

    应机制得到阐明4 ～9 。本实验利用反相高效液相色谱2离子阱电喷雾串联质谱联用技术直接分析固相

    化学合成七肽粗产物,一次性鉴定出目标肽及其4 个主要副产物的化学结构,讨论了色谱2质谱联用技

    术在固相多肽合成研究中的应用和副产物形成的可能机制 ......