第32 卷

    2004 年6 月

    分析化学(FENXI HUAXUE) 研究报告

    Chinese Journal of Analytical Chemistry

    第6 期

    791～793

    聚乙烯醇缩对甲酰基苯基偶氮变色酸萃取

    亲水蛋白质及其作用机理

    金 谷

    3

    李吉峰 杨 健

    (中国科学技术大学化学系,合肥230026)

    摘 要 探讨了高分子试剂聚乙烯醇缩对甲酰基苯基偶氮变色酸( PV·FPNS) 与牛血清蛋白(BSA) 和牛血红

    蛋白(BHA) 的相互作用,并依此采用浊点萃取法(以Tween 80 作为溶剂) 实现了上述两种蛋白质的定量萃取。

    研究了不同羟基取代度的高分子试剂对反应和萃取率的影响,并与相应的小分子试剂FPNS 体系进行了比

    较。研究结果表明: PV·FPNS 与亲水蛋白质的相互作用主要靠静电力,且有高萃取率; FPNS 与两种蛋白质

    也有类似的相互作用,但这种作用未能改善萃取效率;这进一步证明了靠静电作用生成一定结构的高分子化

    合物是提高萃取率的关键。

    关键词 蛋白质,聚乙烯醇缩对甲酰基苯基偶氮变色酸,相互作用,液固萃取

    2003203216 收稿;2003212230 接受

    本文系国家自然科学基金资助课题(No. 29405038)

    1 引 言

    浊点萃取法(CPE) 用于金属离子1 ,2 、环境污染物3 ,4 及疏水性蛋白质的分离已有报道5 ,6 ,然而该

    方法对亲水性蛋白萃取困难。常用于亲水性蛋白萃取的方法之一是双水相萃取法,但萃取率往往较低

    (40 %～70 %) ,难以达到定量分离的目的。本研究利用自己合成的不同取代度的亲水性高分子聚乙烯

    醇缩对甲酰基苯偶氮变色酸(PV·FPNS) 9 分别以牛血清蛋白(p I = 4. 8) 、牛血红蛋白(p I = 7. 1) 及其混

    合体系为对象,研究了它们之间的相互作用并进行萃取分离。

    2 实验部分

    2. 1 仪器和试剂

    TU21901 紫外2可见分光光度计(北京通用仪器有限公司) 。Tween280 ( Sigma 公司) ;牛血清蛋白

    (华美生物,BSA) 10 g/ L , 牛血红蛋白(天津中山研究所,BHA) 1 g/ L ;两种蛋白的混合溶液:牛血清蛋白

    10 g/ L 、牛血红蛋白1 g/ L ,PV·FPNS (柱色谱提纯) 1. 4 g/ L ,Clark2Lubs (邻苯二甲酸氢钾2HCl) 缓冲溶 ......