CD4+CD45RBhigh T细胞转入 SCID 鼠诱
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陆丽华, 冉志华
β-catenin;Wnt信号通路;消化道肿瘤,CD4+CD45RBhighT细胞转入SCID鼠诱导的结肠炎模型,陆丽华,冉志华,通讯作者:,电话:,收稿日期:,接受日期:,摘要,关键词:,0引言
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陆丽华, 冉志华, 上海交通大学医学院附属仁济医院 上海市消化疾病研究所 上海市 200001
甘肃省中青年科学技术基金资助项目, No.YS031-A21-023
通讯作者: 冉志华, 200001, 上海市, 上海交通大学医学院附属仁济医院, 上海市消化疾病研究所. z-ran@online.sh.cn
电话:021-63260930
收稿日期: 2005-12-12 接受日期: 2005-12-24
摘要
炎症性肠病的病因未明, 因此此疾病的动物模型的制备比较困难. 现有的多种制模方法都不能完全模拟人的炎症性肠病. 我们介绍一种比较新的免疫方法诱导的结肠炎动物模型, 即用CD4+CD45RBhigh T细胞转入SCID鼠诱导产生结肠炎. 以下就此模型的制备方法、原理、特点、与IBD的相似处、用途、优缺点作一综述.
关键词: β-catenin; Wnt信号通路; 消化道肿瘤
陆丽华, 冉志华. CD4+CD45RBhighT细胞转入SCID鼠诱导的结肠炎模型. 世界华人消化杂志 2005;13(24):2866-2869
http://www.wjgnet.com/1009-3097/13/2866.asp
0 引言
炎症性肠病 (IBD) 是一种慢性非特异性胃肠道炎症性疾病, 包括克罗恩病 (CD) 和溃疡性结肠炎 (UC). 它的病因未明, 发病有免疫、遗传、环境、微生物等因素参与. 由于IBD的发病机制复杂, 所以很难建立理想的动物模型. 我们介绍一种较新的免疫方法诱导的结肠炎动物模型, 即用CD4+CD45RBhigh T细胞转入SCID鼠诱导产生结肠炎. SCID鼠全称为严重联合免疫缺陷鼠, 1983年由Bosma et al培育成功, 是一种淋巴细胞分化过程严重受损的突变小鼠, 因其抗原受体基因重组异常, T、B淋巴细胞不能发育成熟, 机体的体液和细胞免疫功能均缺陷[1]. 在SCID鼠中转入CD4+CD45RBhigh T细胞后由肠内细菌导致Th1型免疫反应介导的结肠炎.
1 建立方法
1.1 结肠炎的诱导 实验者用抗CD4的磁性活化细胞分离系统从正常BALB/c鼠的脾中分离出CD4+T细胞. 纯化的CD4+T细胞用接合藻红蛋白 (PE) 的抗小鼠CD4和接合异硫氰酸荧光素 (FITC) 的抗小鼠CD45RB单克隆抗体标记, 在流式细胞仪上分类为CD4+CD45RBhigh T细胞和CD4+CD45RBlowT细胞[2]. CD4+CD45RBhigh T细胞是CD4+T细胞群中染色最亮的, 占40-50%, 其分离后纯度至少达到98%. 然后每只BALB/cSCID鼠腹腔内注射200 μL磷酸盐缓冲溶液, 其中含有5×105 CD4+CD45RBhighT细胞[3,4]. 其它报道的腹腔内注射剂量可为1-10×105的CD45RBhighCD4+T细胞.
1.2 临床表现 SCID鼠转入CD4+CD45RBhigh T细胞后3-5 wk小鼠体质量缓慢减轻[5], 到30 d时平均减轻25%[6]. 鼠出现竖毛、拱背, 有软便甚至腹泻. 部分实验者提及鼠有血便[7]、直肠脱垂[8]. 一些研究选择在7 wk时给予临床评分, 为以下3个参数的总和: 0或1, 拱背和体质量减轻; 结肠增厚0-3(0: 无结肠增厚; 1: 轻度增厚; 2: 中度增厚; 3: 重度增厚); 粪便黏度0-3(0: 正常粪便; 1: 软便; 2: 腹泻; 3: 肉眼血便)[9].
1.3 大体形态 此模型中病变广泛分布于直肠至盲肠, 结肠炎的发病率和严重度通常在直肠至横结肠最重, 盲肠相对最轻. 鼠的结肠肠壁增厚, 肠管缩短, 其炎症一般位于黏膜, 严重者为透壁性炎症[3] ......
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