关键词: 基因;软骨细胞;骨形成蛋白

    摘 要:目的 探讨基因转移效率与pcDNA3-hBMP3质粒及阳离子脂质体的浓度、转染时机以及细胞的种殖密度等因素的关系，以寻求最佳的基因转染条件. 方法 细胞密度按2×104 ·cm

    -2 接种后，对细胞接种后即时、孵化2，5和7d进行转染效率研究;G418浓度每mL DMEM分别含有200，300，400，500和600μg，探讨G418对软骨细胞的杀伤作用;选择不同细胞接种密度、不同脂质体浓度和pcDNA3-BMP3浓度，在细胞对数生长期且细胞融合至70%～80%时开始做转染，各组软骨细胞爬片的原位杂交结果通过计算机图像分析，以其灰度值判定基因转染的效率. 结果 最佳期的转染时机为软骨细胞接种后在孵箱内放置2d转染，即在软骨细胞对数生长期内做转染.G418对软骨细胞的最佳筛选浓度为400mg·L-1 .最佳的细胞种植密度、pcDNA3-BMP3浓度和脂质体的量应分别为2×10 4 ·cm-2 ，5μL和10μL. 结论 通过本研究探索出脂质体介导下pcDNA3-BMP3转染兔关节软骨细胞的最佳条件.

    Situation of recombined pcDNA3┐hBMP3transfect┐ing rabbit articular chondrocyte with help of profec┐tamine

    HAN Yi-Sheng，HU Yun-Yu，JIN Ge-Le，LI Song-Jian

    Institute of Orthopaedics of Chinese PLA，Xijing Hospital，Fourth Military Medical University，Xi'an710033，China

    Keywords:gene;chondrocyte;BMP

    Abstract:AIM To explore the relationship between the ef-ficiency of the gene transfection in vitro and the amount of re-combination pcDNA3-hBMP3，the transfection opportunity and cell density ect to find the best situation of gene trans-fection to chondrocyts.METHODS We studied the different time points of transfection to find its best opportunity and the action of G418in different densities of200/300/400/500/600μg in order to get its screen density.The different densities of chondrocytes of1×104 ·cm -2 ......