关键词: 荧光抗体技术;激光;显微镜检查

    0 引言

    免疫组织化学方法是对细胞及细胞内的某种抗原物质进行定性、定位或定量检测的方法.随着标记技术的不断改进，使得免疫组织化学方法检测的敏感性大大增强;随着显微镜技术的发展，且与计算机技术的不断结合，可以对抗原物质作更加精确和全面的定位.我们应用酪氨信号放大间接免疫荧光组织化学方法，并结合激光共聚焦显微镜术对脑动脉Y1 受体免疫反应物质分布进行了观察.

     1 材料和方法

    1.1 酪氨信号放大间接免疫荧光组织化学方法 11只SD大鼠(200～250g)，戊巴比妥钠(50mg·kg-1 ，ip)麻醉，经心脏灌注37℃生理盐水50mL和37℃的40g·L-1 多聚甲醛和2g·L-1 苦味酸磷酸缓冲固定液50mL，再灌注4℃同样固定液250mL，取大鼠全脑，在同样固定液中后固定1.5h，200g·L-1 蔗糖浸泡24h以上.4只大鼠分离其脑底部表面脑动脉，尽可能分离到最细的分支，有大脑前动脉、大脑前内动脉、大脑中动脉、颈内动脉、大脑后动脉、小脑上动脉、基底动脉和椎动脉及其分支;从其他3只大鼠片下脑底部的表层脑组织，其中含有完整的脑表面血管网.

    根据酪氨信号放大间接免疫荧光组织化学方法 ......