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编号:10858665
BCR/ABL癌蛋白片段的表达、纯化及其抗血清的制备
http://www.100md.com 《第四军医大学学报》 2001年第14期
基因表达,,bcr,abl;基因表达;融合蛋白;抗血清,0引言,1材料和方法,2结果,3讨论,参考文献
     关键词: bcr/abl;基因表达;融合蛋白;抗血清

    摘 要:目的 克隆并表达bcr/abl融合基因片段,并制备其抗血清. 方法 PCR扩增包含蛋白融合点的bcr/abl癌基因片段,序列测定后克隆入带有His标签的原核表达载体pET-16b,转化宿主菌BL21,IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达结果,Ni-NTA树脂亲和纯化,皮下多点注射免疫小鼠,ELISA确认抗血清的滴度. 结果 PCR扩增得到大小约523bp的目的片段,序列测定表明与发表序列完全一致;得到了一种新的癌基因bcr/abl片段的原核表达载体pET-16b-bcr/abl,在BL21中表达可见于Mr21×103 处有一蛋白新生带,表达的BCR/ABL蛋白免疫小鼠后,ELESA确认抗血清的滴度>1∶2000. 结论 成功的克隆、表达了bcr/abl融合基因片段,并制备了相应的抗血清.

    Expression and purification of BCR/ABL fusion protein and the production of its antiserum

    LIANG Ying-Min JIANG Shan-Shan SUN Qiang Wu Rong-Li CHEN Ping LI Rong ZHOU Peng WANG Jian HAN Hua

    1 Department of Hematology,Tangdu Hospital,Xi'an710038,China,

    2 Department of Genetic&De-velopmental Biology,Faculty of Preclinical Medicine,Fourth Military Medical University

    Keywords:bcr/abl;gene expression;fusion protein;immune serum ......

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