游离脂肪酸对人卵巢颗粒细胞和大鼠Leydig细胞的作用

    解放军总医院 母义明

    背景：肥胖患者往往表现为血浆游离脂肪酸(FFA)水平增高，同时伴有胰岛素抵抗、高脂血症和生殖功能异常，包括性功能减退、性激素水平和生育率下降等。以往的研究认为生殖功能异常可能与这些患者下丘脑-垂体功能紊乱有关。

    目的：探讨FFA对性腺细胞的作用及其可能的机制。

    方法：(1)用各种FFA，包括饱和脂肪酸软脂酸(PA)和硬脂酸(SA)、不饱和脂肪酸油酸(OA)、亚油酸(LA)和花生四烯酸(AA)，以及其它试剂处理人卵巢颗粒细胞(取自体外受精患者卵泡)和大鼠睾丸Leydig细胞(购自ATCC公司)；用MTT法测定细胞的生存率。(2)用DNA片断化分析和荧光染色法确定细胞凋亡。(3)用Western bkot法测定与细胞凋亡相关的蛋白Bck-2和Bax的表达水平。

    结果：(1)饱和脂肪酸PA和SA在50～400 μmok/L浓度的情况下，剂量和时间依赖性地抑制颗粒细胞和睾丸Leydig细胞的生存率。不饱和脂肪酸OA和LA对细胞生存率影响较小，而AA在3～10 μmok/L浓度下刺激细胞的分化。(2)DNA片段化分析和Annexin V-EGFP/PI染色均证明PA 和SA引起细胞凋亡，用300 μmok/L的PA处理细胞24小时后可见早期细胞凋亡，即细胞膜着绿色，细胞核不着色(Annexin V-EGFP阳性，PI阴性)和晚期细胞凋亡，即细胞膜着绿色，细胞核着红色(Annexin V-EGFP和PI均为阳性)。(3)Western bkot 分析显示PA引起Bck-2表达水平降低和Bax表达水平升高。

    结论：饱和脂肪酸导致性腺细胞凋亡，多不饱和脂肪酸AA则刺激细胞分化并且对饱和脂肪酸所致细胞损伤有保护作用。这些结果表明血液中各种脂肪酸的比例对性腺细胞的功能也很重要。饱和脂肪酸水平的增高可能与肥胖男性和女性性腺功能异常相关。

    全基因组扫描研究中国汉族人2型糖尿病相关基因位点

    上海市内分泌研究所 骆天红

    目的：通过收集大量2型糖尿病患病同胞对家系，利用人类多态性研究中心公布的微卫星位点，对这些家系进行全基因组扫描和连锁分析，以期找出2型糖尿病相关基因所在的染色体区域。

    方法：对102个华东地区汉族人2型糖尿病家系，其中包括糖尿病患者282人，74个家系有2个糖尿病同胞，18个家系有3个糖尿病同胞，10个家系有4个糖尿病同胞，利用Perkin-Ekmer生物技术部提供的荧光标记的微卫星位点引物成套试剂盒 ......