表达人GMCSF的K562细胞株的构建及鉴定
疫苗,,K562,GMCSF,疫苗,0引言,1材料和方法,2结果,3讨论,【参考文献】
【关键词】 K562,GMCSF,疫苗0引言
粒-巨细胞集落刺激因子GMCSF在肿瘤主动免疫治疗中的重要作用已经得到肯定[1,2]. 我们构建稳定表达GMCSF的K562细胞株,为肿瘤免疫治疗在临床上的广泛开展奠定基础.
1材料和方法
1.1材料
真核瞬时表达质粒pSVLhGMCSF及TF1细胞株由西安交通大学生命科学院免疫病理教研室馈赠. K562细胞株、COS7细胞株为本室保存. pCDNA3.1(-)、Lympofectamin为Invitrogen公司产品. 人GMCSF细胞因子ELISA检测试剂盒为晶美生物公司产品.
1.2方法
① pcDNA3.1GMCSF真核表达质粒的构建及鉴定: BamHI, XhoI双酶切质粒pSVLhGMCSF,回收GMCSF片段,克隆入pCDNA3.1(-),获得pcDNA3.1GMCSF. 重组质粒瞬时转染COS7细胞 ......
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