印楝茎尖组织培养的研究.pdf
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2006年2月23日
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参见附件(158KB,4页)。
第 1期 总第 1 0 2期
2 0 0 3年 3月
云 南 林 业 科 技
Yu n n a n F o r e s t r y S c i e n c e a n d T e c h n o l o s y
No . 1
Mar c h .2 00 3
印楝茎尖组织培养的研究。
陈 芳 ,陈子牛 ,陆 斌 ,马显达 ,陈 娟
( 1 .云南省林业科学院,云南 昆明6 5 0 2 0 4;2 .昆明师范专科学校 。云南 昆明6 5 0 0 3 1 )
擒要:以印楝茎尖为外植体进行离体快速繁殖,外植体采用次氯酸钠预处理,用O . 1%的 H g c l 2 浸泡消毒,共设
6 6个处理,3次重复,分3次试验。结果表明,芽增殖培养基最佳组合为 M S+6一B A 7 . 0 m ~ L+I 从 o - 0 1 m g L
+Z T0 . 1 m g L ,生根培养基为1 2 MS +N A A0 . 5 m g L ,能有效促进芽生根,且移栽成活率可达 8 0%以上。
关量词:印楝;茎尖;组织培养
中圈分类号:S 7 9 2 . 3 3 ;Q 8 1 3 . 1 2 文献标识码:A 文章编号:1 0 0 7- 3 3 5 3( 2 0 o 3 )0 1- 0 o o 8- 0 4
印楝 ( A z a d i r a c l u a i n d i c a)系楝科楝属乔木,原产印度和缅甸。该树种含有印楝素等 8 0余种杀
虫及杀菌活性物质,是 目前世界公认提取高效生物
杀虫剂的最佳植物,因具有巨大的商业开发价值,而倍受世界各国政府与科学家们的关注。
据分析,印楝在不同种源或同一种源不同个体
间,印楝素含量存在明显的差异,优良品种为一般
品种的 l 0多倍 ,种子繁殖后代分化严重,林相不
整齐,产量不高,而且种子寿命短,难于保存和异
地长途运输。因此,快速、大量获得性状一致的种
苗,是印楝发展中亟待解决的问题。本文报道应用
组织培养方法对印楝茎尖进行快速繁殖 的研究结
果 。
1 材料与方法
1 . 1 材料及处理
以 1 9 9 9年从印度及缅甸引种的高印楝素优 良
单株的幼嫩枝条为试验材料,经 自来水冲洗干净
后,在超净工作台上用次氯酸钠消毒 1 0 m i n,再用
0 . 1%升汞浸泡 1 5 m i n ,然后用无菌水冲洗 4~5
次,剥光叶片,切取0 . 5一1 . 0 c m茎尖 ,接种到无
生长素的 MS( Mu r a s h i g e和 S k o o g 1 9 6 2 )培养基上
初代培养。
1 . 2 方法
1 . 2 . 1 芽的增殖培养
初代培养 l 5~2 0天后,把获得的茎尖材料接
种到 1 0 0 mL三角瓶中,培养基为 MS并附加不同
配比的生长调节剂 ,蔗糖 3 0 L,琼脂 6 g L ,把
p H调到5 . 8 。分别采用不同的生长调节剂进行了 3
次连续的试验,用来检验生长调节剂对印楝茎尖离
体培养增殖的影响,目的是从单芽中获得丛生芽的
微繁殖系统,其中第 1次试验共设 4 2个处理 ,采
用浓度为 0 . 1 、1 . 0 、2 . 0 mg L的细胞分裂素 6一
B A ( 6一苄基腺嘌呤)或 K T ( 糠基腺嘌呤) ,分
别加人浓度为0 . 0 0 、0 . 0 1 mg L的生长素 【 A A ( 吲
哚 乙酸)或 浓度 为 0 . 0 、0 . 1 、0 . 3 、0 . 5 、0 . 7 、0 . 9 m g L的N A A ( 萘乙酸) ;第2次试验共8个处
理,采用浓度为0 . 0 0 、0 . 0 1 m g L的【 从 分别与浓
度为 1 . 0 、3 . 0 、5 . 0 、7 . 0 mg L的 6一B A组合;
第 3次试验共 l 6个处理 ,采用浓度为 5 . 0 、7 . 0 、9 . 0 、l 1 . 0 mg L 6一B A分别与浓度为 0 . 0 、0 . 1 、0 . 5 、1 . 0 mg L的 Z T ( 玉米素)组合,并在这 l 6
个组合中分别附加上浓度为 0 . 0 1 m g L的 【 从 。3
次试验中的每个处理均为 3次重复,采用完全随机
法 ,在温度 2 5± 2 ~ C,人工光照 1 2 h ,光照强度 3
0 0 0 L x的条件下,培养4周后 ,记录各外植体增殖
的芽数、芽的长度。结果以显著性水平 R∞检验,分析其平均数的显著性差异水平。
1 . 2 . 2 芽诱导生根和植株形成
把长至 1 . 5 e m以上的芽 ,从芽丛中切离转接
到装有5 0 m L生根培养基中进行生根诱导,诱导培
养基为 1 2 MS和 MS ,分别附加浓度为 0 . 0 、0 . 1 、0 . 3 、0 . 5 、0 . 7 、0 . 9 mg L的 N 从 及蔗糖 2 o L,· 收稿 日期 :2 0 0 2—0 5—2 3
第一作者筒介:陈 芳 ( 1 9 6 5一) ,女,云南昆明人 ,高级工程师,主要从事林木组织培养研究。
维普资讯 http:www.cqvip.com 第 1期 陈 芳等:印楝茎尖组织培养的研究 9
琼脂 6 g L ,将 p H值调至 5 . 8 ,每个容器接种 5个
芽。2个容器为 1个处理,3次重复,5周后,记
录已生根的芽数。
1 . 2 . 3 植株移栽
把已生根的小苗取出,用 自来水冲洗干净后 ,移栽到以泥炭土和珍珠岩 ( 4 :1 )配成的育苗基
质中,用透 明塑料薄膜覆盖保湿 ,放在玻璃温室
内,炼苗 3周后揭开覆盖物,让其继续生长。
2 结果与分析
2 . 1 生长调节剂对芽增殖的影响
在芽的增殖培养试验中,芽及腋芽的数量、芽
的长度都受生长调节剂的不同类型和浓度影响。当
加人相同浓度的生长素,随着细胞分裂素浓度的增
高 ......
2 0 0 3年 3月
云 南 林 业 科 技
Yu n n a n F o r e s t r y S c i e n c e a n d T e c h n o l o s y
No . 1
Mar c h .2 00 3
印楝茎尖组织培养的研究。
陈 芳 ,陈子牛 ,陆 斌 ,马显达 ,陈 娟
( 1 .云南省林业科学院,云南 昆明6 5 0 2 0 4;2 .昆明师范专科学校 。云南 昆明6 5 0 0 3 1 )
擒要:以印楝茎尖为外植体进行离体快速繁殖,外植体采用次氯酸钠预处理,用O . 1%的 H g c l 2 浸泡消毒,共设
6 6个处理,3次重复,分3次试验。结果表明,芽增殖培养基最佳组合为 M S+6一B A 7 . 0 m ~ L+I 从 o - 0 1 m g L
+Z T0 . 1 m g L ,生根培养基为1 2 MS +N A A0 . 5 m g L ,能有效促进芽生根,且移栽成活率可达 8 0%以上。
关量词:印楝;茎尖;组织培养
中圈分类号:S 7 9 2 . 3 3 ;Q 8 1 3 . 1 2 文献标识码:A 文章编号:1 0 0 7- 3 3 5 3( 2 0 o 3 )0 1- 0 o o 8- 0 4
印楝 ( A z a d i r a c l u a i n d i c a)系楝科楝属乔木,原产印度和缅甸。该树种含有印楝素等 8 0余种杀
虫及杀菌活性物质,是 目前世界公认提取高效生物
杀虫剂的最佳植物,因具有巨大的商业开发价值,而倍受世界各国政府与科学家们的关注。
据分析,印楝在不同种源或同一种源不同个体
间,印楝素含量存在明显的差异,优良品种为一般
品种的 l 0多倍 ,种子繁殖后代分化严重,林相不
整齐,产量不高,而且种子寿命短,难于保存和异
地长途运输。因此,快速、大量获得性状一致的种
苗,是印楝发展中亟待解决的问题。本文报道应用
组织培养方法对印楝茎尖进行快速繁殖 的研究结
果 。
1 材料与方法
1 . 1 材料及处理
以 1 9 9 9年从印度及缅甸引种的高印楝素优 良
单株的幼嫩枝条为试验材料,经 自来水冲洗干净
后,在超净工作台上用次氯酸钠消毒 1 0 m i n,再用
0 . 1%升汞浸泡 1 5 m i n ,然后用无菌水冲洗 4~5
次,剥光叶片,切取0 . 5一1 . 0 c m茎尖 ,接种到无
生长素的 MS( Mu r a s h i g e和 S k o o g 1 9 6 2 )培养基上
初代培养。
1 . 2 方法
1 . 2 . 1 芽的增殖培养
初代培养 l 5~2 0天后,把获得的茎尖材料接
种到 1 0 0 mL三角瓶中,培养基为 MS并附加不同
配比的生长调节剂 ,蔗糖 3 0 L,琼脂 6 g L ,把
p H调到5 . 8 。分别采用不同的生长调节剂进行了 3
次连续的试验,用来检验生长调节剂对印楝茎尖离
体培养增殖的影响,目的是从单芽中获得丛生芽的
微繁殖系统,其中第 1次试验共设 4 2个处理 ,采
用浓度为 0 . 1 、1 . 0 、2 . 0 mg L的细胞分裂素 6一
B A ( 6一苄基腺嘌呤)或 K T ( 糠基腺嘌呤) ,分
别加人浓度为0 . 0 0 、0 . 0 1 mg L的生长素 【 A A ( 吲
哚 乙酸)或 浓度 为 0 . 0 、0 . 1 、0 . 3 、0 . 5 、0 . 7 、0 . 9 m g L的N A A ( 萘乙酸) ;第2次试验共8个处
理,采用浓度为0 . 0 0 、0 . 0 1 m g L的【 从 分别与浓
度为 1 . 0 、3 . 0 、5 . 0 、7 . 0 mg L的 6一B A组合;
第 3次试验共 l 6个处理 ,采用浓度为 5 . 0 、7 . 0 、9 . 0 、l 1 . 0 mg L 6一B A分别与浓度为 0 . 0 、0 . 1 、0 . 5 、1 . 0 mg L的 Z T ( 玉米素)组合,并在这 l 6
个组合中分别附加上浓度为 0 . 0 1 m g L的 【 从 。3
次试验中的每个处理均为 3次重复,采用完全随机
法 ,在温度 2 5± 2 ~ C,人工光照 1 2 h ,光照强度 3
0 0 0 L x的条件下,培养4周后 ,记录各外植体增殖
的芽数、芽的长度。结果以显著性水平 R∞检验,分析其平均数的显著性差异水平。
1 . 2 . 2 芽诱导生根和植株形成
把长至 1 . 5 e m以上的芽 ,从芽丛中切离转接
到装有5 0 m L生根培养基中进行生根诱导,诱导培
养基为 1 2 MS和 MS ,分别附加浓度为 0 . 0 、0 . 1 、0 . 3 、0 . 5 、0 . 7 、0 . 9 mg L的 N 从 及蔗糖 2 o L,· 收稿 日期 :2 0 0 2—0 5—2 3
第一作者筒介:陈 芳 ( 1 9 6 5一) ,女,云南昆明人 ,高级工程师,主要从事林木组织培养研究。
维普资讯 http:www.cqvip.com 第 1期 陈 芳等:印楝茎尖组织培养的研究 9
琼脂 6 g L ,将 p H值调至 5 . 8 ,每个容器接种 5个
芽。2个容器为 1个处理,3次重复,5周后,记
录已生根的芽数。
1 . 2 . 3 植株移栽
把已生根的小苗取出,用 自来水冲洗干净后 ,移栽到以泥炭土和珍珠岩 ( 4 :1 )配成的育苗基
质中,用透 明塑料薄膜覆盖保湿 ,放在玻璃温室
内,炼苗 3周后揭开覆盖物,让其继续生长。
2 结果与分析
2 . 1 生长调节剂对芽增殖的影响
在芽的增殖培养试验中,芽及腋芽的数量、芽
的长度都受生长调节剂的不同类型和浓度影响。当
加人相同浓度的生长素,随着细胞分裂素浓度的增
高 ......
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