纯种芳樟的组织培养技术.pdf
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2006年2月23日
第1页 |
参见附件(120KB,2页)。
纯种芳樟的
组织培养技术
纯种芳樟, 即芳樟叶油中芳樟醇含量达9 5 %以上, 樟
脑含量0 . 5 %以下的香樟, 为常绿乔木, 原产我国长江流
域以南各地,其枝叶可提取樟脑和樟油,为化工及医药
上重要原料。芳樟醇是芳樟叶油中的主要成分,其用途
十分广泛,在今后十年内市场十分紧缺,而天然芳樟醇
尤为如此。香樟常规以播种、 扦插. 分蘖等方法繁殖, 但
本试验采用的母树为经过测定芳樟叶油含芳樟醇高达
9 8 %的稀有芳樟, 如果采用播种繁殖容易产生性状分离,很难保持母树原有芳樟醇含量极高的优良特性,采用扦
插和分蘖繁殖,由于母树枝条数量有限,很难满足市场
的需求。因此,研究芳樟组织培养快速繁殖技术有着十
分重要的意义,本试验所生产出的组培苗经栽培测定芳
樟醇含量与母树含量基本一致,它的研究成功为纯种芳
樟种苗生产进入工厂化提供了可靠的依据,对大规模降
低芳樟醇的生产成本有着十分重要的意义。
材料和方法
试材处理 选取当年生幼嫩枝条带腋芽茎段,除去
叶片,保留卜2 c m长的叶柄,并将茎段切成4 - 6 c m长,先用自来水冲洗3 0 分钟后,再用洗衣粉水浸泡3 0 分钟,然后在超净工作台上用7 5 %酒精浸泡6 0 秒,再用0 . 1 %
升汞溶液浸泡 1 5 - 2 0分钟,无菌水冲洗4 - 6 次,两端及
叶柄各切去l c m左右, 然后切成1 c m左右长度的茎段, 每
段带 1 个腋芽,接种于预制好的各种培养基上。
试验方法及培养条件 基本培养基和启动培养基的
选择,采用MS 、1 2 MS 、Wh i t e 、改良的MS( 以下作
者自命名为ML 培养基) 为
基本培养基,在相同的培
养条件下 ( 即用食糖代替
蔗糖,含量3 0 g L ,加6 一
BA2 mg L.NAA0. 5 mg
L, p H5 . 8 , 培养温度2 8 ℃
左右, 采用日光灯, 光强在
1 5 0 0 - 2 0 0 0 L x,光照时数
1 0 -1 2 h d ) 每组重复3 次,24
中国花卉园艺 2 0 0 3 1 0
口 张梅坤 刘荣忠 曾陆三
每次3 0 个芽,筛选出最适基本培养基。
增殖培养基的选择,以筛选出的最适基本培养基作
为标准,分别附加6 - B A2 、1 . 5 、1 . 2 、l mg L四个浓度
水平,NAA0 . 8 、0 . 4 、0 . 2 三个水平,共 1 2 个组合,每
瓶7 个团块,每次处理 1 0 瓶,重复3 次筛选增殖培养基
中6 - B A和NAA最佳组合。
生根培养基的选择以筛选出的最适基本培养基作为
标准,设置I B A0 . 3 、0 . 5 、0 . 9 、1 . 0 四个浓度水平,摸
索最佳生根培养基。
结果与分析
基本培养和启动培养基的选择 接种后经4 0 天的
培养, 观察生长状况。采用MS培养基, 腋芽能萌发也能
形成丛生芽,但叶片和茎生长极不正常,即叶片卷曲不
能正常展开且叶片变厚最后变褐脱落,茎上到处有愈伤
组织长出; 采用l 2 MS S N Wh i t e 培养基, 腋芽很难萌发,也很难形成丛生芽,采用ML培养基,腋芽正常萌发,能
形成丛生芽, 叶片及茎生长都正常, 通过比较分析,选择
ML作为基本培养基效果较佳 ( 具体见表 1 ) ,以ML + 6 -
B A2 c + NAA o . 5 为最佳启动培养基 ......
组织培养技术
纯种芳樟, 即芳樟叶油中芳樟醇含量达9 5 %以上, 樟
脑含量0 . 5 %以下的香樟, 为常绿乔木, 原产我国长江流
域以南各地,其枝叶可提取樟脑和樟油,为化工及医药
上重要原料。芳樟醇是芳樟叶油中的主要成分,其用途
十分广泛,在今后十年内市场十分紧缺,而天然芳樟醇
尤为如此。香樟常规以播种、 扦插. 分蘖等方法繁殖, 但
本试验采用的母树为经过测定芳樟叶油含芳樟醇高达
9 8 %的稀有芳樟, 如果采用播种繁殖容易产生性状分离,很难保持母树原有芳樟醇含量极高的优良特性,采用扦
插和分蘖繁殖,由于母树枝条数量有限,很难满足市场
的需求。因此,研究芳樟组织培养快速繁殖技术有着十
分重要的意义,本试验所生产出的组培苗经栽培测定芳
樟醇含量与母树含量基本一致,它的研究成功为纯种芳
樟种苗生产进入工厂化提供了可靠的依据,对大规模降
低芳樟醇的生产成本有着十分重要的意义。
材料和方法
试材处理 选取当年生幼嫩枝条带腋芽茎段,除去
叶片,保留卜2 c m长的叶柄,并将茎段切成4 - 6 c m长,先用自来水冲洗3 0 分钟后,再用洗衣粉水浸泡3 0 分钟,然后在超净工作台上用7 5 %酒精浸泡6 0 秒,再用0 . 1 %
升汞溶液浸泡 1 5 - 2 0分钟,无菌水冲洗4 - 6 次,两端及
叶柄各切去l c m左右, 然后切成1 c m左右长度的茎段, 每
段带 1 个腋芽,接种于预制好的各种培养基上。
试验方法及培养条件 基本培养基和启动培养基的
选择,采用MS 、1 2 MS 、Wh i t e 、改良的MS( 以下作
者自命名为ML 培养基) 为
基本培养基,在相同的培
养条件下 ( 即用食糖代替
蔗糖,含量3 0 g L ,加6 一
BA2 mg L.NAA0. 5 mg
L, p H5 . 8 , 培养温度2 8 ℃
左右, 采用日光灯, 光强在
1 5 0 0 - 2 0 0 0 L x,光照时数
1 0 -1 2 h d ) 每组重复3 次,24
中国花卉园艺 2 0 0 3 1 0
口 张梅坤 刘荣忠 曾陆三
每次3 0 个芽,筛选出最适基本培养基。
增殖培养基的选择,以筛选出的最适基本培养基作
为标准,分别附加6 - B A2 、1 . 5 、1 . 2 、l mg L四个浓度
水平,NAA0 . 8 、0 . 4 、0 . 2 三个水平,共 1 2 个组合,每
瓶7 个团块,每次处理 1 0 瓶,重复3 次筛选增殖培养基
中6 - B A和NAA最佳组合。
生根培养基的选择以筛选出的最适基本培养基作为
标准,设置I B A0 . 3 、0 . 5 、0 . 9 、1 . 0 四个浓度水平,摸
索最佳生根培养基。
结果与分析
基本培养和启动培养基的选择 接种后经4 0 天的
培养, 观察生长状况。采用MS培养基, 腋芽能萌发也能
形成丛生芽,但叶片和茎生长极不正常,即叶片卷曲不
能正常展开且叶片变厚最后变褐脱落,茎上到处有愈伤
组织长出; 采用l 2 MS S N Wh i t e 培养基, 腋芽很难萌发,也很难形成丛生芽,采用ML培养基,腋芽正常萌发,能
形成丛生芽, 叶片及茎生长都正常, 通过比较分析,选择
ML作为基本培养基效果较佳 ( 具体见表 1 ) ,以ML + 6 -
B A2 c + NAA o . 5 为最佳启动培养基 ......
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