刺五加HPLCUVMS指纹图谱研究.PDF
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2006年2月23日
| 第1页 |
参见附件(139KB，3页)。
中 国 药 科 大 学 学 报
Journal of China Pharmaceutical University 2003 ,34 (2) :148～150
刺五加 HPLC UV MS指纹图谱研究
余 静 ,李 茜 ,沈文斌 ,张尊建X
(中国药科大学分析测试中心 ,南京 210009)
【摘 要】 目的:采用 HPLC UVMS法分别对刺五加药材水溶性和脂溶性成分进行指纹图谱研究 ,并对其
主要成分进行定性。方法:采用岛津 ODS C18 (416 mm× 150 mm ,5μm)柱和Agilent ZORBAX SB2C18柱(250 mm× 416
mm ,5μm) ,分别用015 %冰醋酸乙腈、 015 %冰醋酸、乙腈、 011 %甲酸为流动相梯度洗脱 ,流速:1 ml min。结果:得
到分离度和重现性均较好的刺五加药材 HPLC UV及 HPLCMS指纹图谱 ,并分别对水溶性成分指纹图谱中 5 个
色谱峰和脂溶性成分指纹图谱中8 个色谱峰进行了初步定性。结论:本方法可用于刺五加药材的指纹图谱测
定 ,并为其质量控制提供参考。
【关键词】 刺五加; 指纹图谱; 成分研究; HPLC UVMS; 质量控制
【中图分类号】 R94419 ;R945 ;R97915 【文献标识码】 A 【文章编号】 100025048 (2003) 0220148203
刺五加为五加科植物刺五加 Acanthopanax sen2
ticosus (Rupr. et Maxim. ) Harms 的干燥根及根茎[1 ]
,具有益气健脾、补肾安神、益精壮骨之功效[2 ]。其
主要成分为胡萝卜苷(刺五加苷 A) 、丁香苷(刺五
加苷B) 、异秦皮啶葡萄糖苷(刺五加苷B1) 、乙基 -
半乳糖苷(刺五加苷 C) 、紫丁香树脂酚的葡萄糖苷
的两种不同构型(刺五加苷D和 E) 、阿魏酸葡萄糖
苷、咖啡酸、芥子醛和异秦皮啶等[224 ]。中药指纹图
谱已是牵动行业全面进步的关键技术之一 ,对推动
中药现代化、产业化、国际化具有重大作用[5 ]。本
文采用 HPLC UVMS方法对刺五加药材的乙醇提
取物和乙酸乙酯提取液进行分离分析 ,得到了分离
度、重现性均较好的药材指纹图谱 ,并对色谱峰进
行了归属 ,为全面评价刺五加药材的质量提供了参
考。
1 仪器与试剂
岛津LC210ATVP 高效液相色谱仪 ,岛津 SPD2
10AVP检测器 ,浙江大学 N2000 色谱工作站;Agi2
lent 1100 LC DADMS系统 ,含在线真空脱气机、高
压二元梯度泵、恒温自动进样器、柱温箱、光电二极
管阵列检测器(DAD) 、电喷雾( ES)接口 ,HP Chem2
station Rev.A. 0181031色谱工作站。
乙腈(色谱纯) ;冰醋酸、乙醇、乙酸乙酯(均为
分析纯) ;重蒸水;刺五加药材产自黑龙江伊春南
岔 ,经中国药科大学中药学院王强教授鉴定为刺五
加 Acanthopanax senticosus (Rupr. et Maxim. ) Harms ;
绿原酸、丁香苷和异秦皮啶对照品购于中国药品生
物制品检定所。
2 方法与结果
211 供试品的制备
21111 水溶性成分 刺五加药材粉末(过 40 目
筛) 510 g ,加65 %乙醇30 ml ,冷浸12 h ,加热回流2
h ,趁热过滤 ,过 0145μm微孔滤膜 ,作为刺五加药
材水溶性成分供试品。
21112 脂溶性成分 刺五加药材粉末(过 40 目
筛) 510 g ,加乙酸乙酯 40 ml ,加热回流 4 h ,趁热过
滤 ,挥干 ,50 %甲醇 3 ml 溶解 ,过 0145μm 微孔滤
膜 ,作为刺五加药材脂溶性成分供试品。
212 液相色谱条件及分析方法
21211 水溶性成分 色谱柱:岛津 ODS C18柱(150
mm× 416 mm ,5μm) ;流动相:A :015 %冰醋酸 ,B :含
015 %冰醋酸的乙腈;梯度洗脱:0 min :B (10 %) ,10
min :B (10 %) ,40 min :B (40 %) ;流速 1 ml min ;柱
温:25℃;检测波长:270 nm;柱后分流 014 ml min
进质谱仪;MS同时记录总离子流(TIC)色谱图。检
测方式:ESI( + 2) ;扫描范围:80～1000 ;干燥气流
速:10 L min ;雾化室压:40 Pa ;毛细管电压:4 000
V ;裂解电压:70 eV ;进样量:20μl。
841
X【收稿日期】 2002210209 【3
通讯作者】 Tel :02523271454 E 2mail :zjzhang99 @sina. com
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.21211 脂溶性成分 色谱柱 Agilent ZORBAX SB2
C18柱(250 mm× 416 mm ,5μm) ;流动相:A :011 %甲
酸 ,B :乙腈;梯度洗脱 0 min :B (10 %) , 15 min :B
(15 %) ,25 min :B(20 %) ,32 min : B(20 %) ,45 min :
B(35 %) ,65 min :B (90 %) ,70 min :B (90 %) ;流速 1
ml min ;柱温:25℃;检测波长:326 nm;质谱分析条
件同水溶性成分;进样量:20μl ......
Journal of China Pharmaceutical University 2003 ,34 (2) :148～150
刺五加 HPLC UV MS指纹图谱研究
余 静 ,李 茜 ,沈文斌 ,张尊建X
(中国药科大学分析测试中心 ,南京 210009)
【摘 要】 目的:采用 HPLC UVMS法分别对刺五加药材水溶性和脂溶性成分进行指纹图谱研究 ,并对其
主要成分进行定性。方法:采用岛津 ODS C18 (416 mm× 150 mm ,5μm)柱和Agilent ZORBAX SB2C18柱(250 mm× 416
mm ,5μm) ,分别用015 %冰醋酸乙腈、 015 %冰醋酸、乙腈、 011 %甲酸为流动相梯度洗脱 ,流速:1 ml min。结果:得
到分离度和重现性均较好的刺五加药材 HPLC UV及 HPLCMS指纹图谱 ,并分别对水溶性成分指纹图谱中 5 个
色谱峰和脂溶性成分指纹图谱中8 个色谱峰进行了初步定性。结论:本方法可用于刺五加药材的指纹图谱测
定 ,并为其质量控制提供参考。
【关键词】 刺五加; 指纹图谱; 成分研究; HPLC UVMS; 质量控制
【中图分类号】 R94419 ;R945 ;R97915 【文献标识码】 A 【文章编号】 100025048 (2003) 0220148203
刺五加为五加科植物刺五加 Acanthopanax sen2
ticosus (Rupr. et Maxim. ) Harms 的干燥根及根茎[1 ]
,具有益气健脾、补肾安神、益精壮骨之功效[2 ]。其
主要成分为胡萝卜苷(刺五加苷 A) 、丁香苷(刺五
加苷B) 、异秦皮啶葡萄糖苷(刺五加苷B1) 、乙基 -
半乳糖苷(刺五加苷 C) 、紫丁香树脂酚的葡萄糖苷
的两种不同构型(刺五加苷D和 E) 、阿魏酸葡萄糖
苷、咖啡酸、芥子醛和异秦皮啶等[224 ]。中药指纹图
谱已是牵动行业全面进步的关键技术之一 ,对推动
中药现代化、产业化、国际化具有重大作用[5 ]。本
文采用 HPLC UVMS方法对刺五加药材的乙醇提
取物和乙酸乙酯提取液进行分离分析 ,得到了分离
度、重现性均较好的药材指纹图谱 ,并对色谱峰进
行了归属 ,为全面评价刺五加药材的质量提供了参
考。
1 仪器与试剂
岛津LC210ATVP 高效液相色谱仪 ,岛津 SPD2
10AVP检测器 ,浙江大学 N2000 色谱工作站;Agi2
lent 1100 LC DADMS系统 ,含在线真空脱气机、高
压二元梯度泵、恒温自动进样器、柱温箱、光电二极
管阵列检测器(DAD) 、电喷雾( ES)接口 ,HP Chem2
station Rev.A. 0181031色谱工作站。
乙腈(色谱纯) ;冰醋酸、乙醇、乙酸乙酯(均为
分析纯) ;重蒸水;刺五加药材产自黑龙江伊春南
岔 ,经中国药科大学中药学院王强教授鉴定为刺五
加 Acanthopanax senticosus (Rupr. et Maxim. ) Harms ;
绿原酸、丁香苷和异秦皮啶对照品购于中国药品生
物制品检定所。
2 方法与结果
211 供试品的制备
21111 水溶性成分 刺五加药材粉末(过 40 目
筛) 510 g ,加65 %乙醇30 ml ,冷浸12 h ,加热回流2
h ,趁热过滤 ,过 0145μm微孔滤膜 ,作为刺五加药
材水溶性成分供试品。
21112 脂溶性成分 刺五加药材粉末(过 40 目
筛) 510 g ,加乙酸乙酯 40 ml ,加热回流 4 h ,趁热过
滤 ,挥干 ,50 %甲醇 3 ml 溶解 ,过 0145μm 微孔滤
膜 ,作为刺五加药材脂溶性成分供试品。
212 液相色谱条件及分析方法
21211 水溶性成分 色谱柱:岛津 ODS C18柱(150
mm× 416 mm ,5μm) ;流动相:A :015 %冰醋酸 ,B :含
015 %冰醋酸的乙腈;梯度洗脱:0 min :B (10 %) ,10
min :B (10 %) ,40 min :B (40 %) ;流速 1 ml min ;柱
温:25℃;检测波长:270 nm;柱后分流 014 ml min
进质谱仪;MS同时记录总离子流(TIC)色谱图。检
测方式:ESI( + 2) ;扫描范围:80～1000 ;干燥气流
速:10 L min ;雾化室压:40 Pa ;毛细管电压:4 000
V ;裂解电压:70 eV ;进样量:20μl。
841
X【收稿日期】 2002210209 【3
通讯作者】 Tel :02523271454 E 2mail :zjzhang99 @sina. com
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.21211 脂溶性成分 色谱柱 Agilent ZORBAX SB2
C18柱(250 mm× 416 mm ,5μm) ;流动相:A :011 %甲
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(15 %) ,25 min :B(20 %) ,32 min : B(20 %) ,45 min :
B(35 %) ,65 min :B (90 %) ,70 min :B (90 %) ;流速 1
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