大孔吸附树脂纯化远志总皂苷工艺研究.PDF
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2006年2月23日
第1页 |
参见附件(153KB,4页)。
制剂多以黄芪甲苷作为质控评价指标 ,且文献报道
较多。本文以黄芪甲苷为指标 ,筛选黄芪的提取工
艺是合理的。
315 文献报导黄芪甲苷的含量测定方法较多,根据
样品的不同 ,处理方法各有差异。文中采用正丁醇
萃取 ,氨水试液洗涤 ,纯化效果较好 ,处理简单。适
用于含黄芪制剂的含量测定。
参考文献:
[1 ] 阴健 ,郭力弓.中药现代研究与临床应用(1) [M] .北京:
学苑出版社 ,1993. 592.
[2 ] 潘飞 ,冯毓秀.黄芪类药用植物皂苷类成分分析[J ] .中
国中药杂志 ,1995 ,20(7) :3912393.
[3 ] 钱广生 ,刘三康. HPLC测定黄芪注射液中黄芪甲苷的
含量[J ] .华西药学杂志 ,2002 ,17(1) :412421
[4 ] 汪红 ,王强. HPLC 2ELSD法测定黄芪及其注射液中黄芪
皂苷的含量[J ] .中国药学杂志 ,2002 ,37(4) :2982300.
[5 ] 方开泰. 均匀设计与均匀设计表[M] . 北京:科学出版
社 ,1994. 1491
大孔吸附树脂纯化远志总皂苷工艺研究
刘友平 ,万德光 ,鄢 丹 ,彭 成
(成都中医药大学 ,四川 成都 611730)
摘要:目的:研究大孔吸附树脂纯化远志总皂苷的工艺条件及参数。方法:以远志总皂苷的洗脱率、精制度为指标 ,考察大
孔吸附树脂对远志总皂苷的吸附性能和洗脱参数。结果:12mL远志总皂苷样品液(生药 0125g mL)上大孔吸附树脂柱(Φ15mm
×H90mm ,干重215g) ,用蒸馏水、 30 %乙醇、 70 %乙醇各3BV依次洗脱 ,远志总皂苷富集于70 %乙醇洗脱液部位。结论:通过大
孔吸附树脂富集与纯化 ,远志总皂苷洗脱率为8918 % ,精制度为23916 %。该法可较好地纯化远志总皂苷。
关键词:大孔吸附树脂;纯化;远志;总皂苷
中图分类号:R28316 文献标识码:B 文章编号:100529903 (2004) 0620003204
Studies on Purif ication of Saponins from Radix Polygalae with Macroporous Resin
LIU You2ping , WAN De2Guang , YAN Dan , PENG Cheng
( Chengdu University of TCM , Chengdu 610075 , China)
Abstract :Objectives : To study the technological parameters of purifying saponin with macroporous resin. Method :
With the elution rate and purity as indexes , the absorption characteristics and elution parameters were studied. Result : 12
mL of the extractive of Radix Polygalae (crude drugs 0125gP mL) was added on a column of macroporous resin (Φ15mm×
H 90mm , dry weight 215g) and was washed with 3BV of distilled water , 30 % ethanol and 70 % ethanol , successively.
Saponin was enriched in the 70 % ethanol elution. Conclusion : Enriched and purified by macroporous resin , the elution
rate of saponin was 8918 % and the purity reached 23916 %. So , the established method is feasible.
Key words :Macroporous resin ; Purification ; Radix Polygalae ; Saponins
远志为常用中药 ,始载于《神农本草经》 ,列为上
品。具有安神益智、祛痰、消肿之功 ,常用于心肾不
交引起的失眠多梦、健忘 ,惊悸、咳痰不爽、疮痈肿
毒、乳房肿痛等[1 ]。远志主要含有远志总皂苷、口山
酮、生物碱、糖及低聚糖酯、脂肪油等 ,其中远志总皂
苷为镇静、祛痰的有效部位[2 ]。本文对大孔吸附树
脂纯化远志总皂苷的工艺条件进行了研究。
收稿日期:2003211221
大孔吸附树脂是一类新型非离子型高分子化合
物 ,近年来在药学领域(特别是天然药物精制)中应
用日益广泛 ,成为纯化中药有效成分的一种有效方
法。已有利用大孔吸附树脂对中药黄芪、三七等皂
苷类成分纯化的报道[3 ,4 ]
,但未见对远志皂苷类成分
纯化的相关报道。影响其纯化效果的主要因素如树
脂类型、吸附容量、洗脱溶剂等常因纯化物质的理化
性质不同而有所不同[5 ]。本实验以吸附容量、洗脱
率、固形物量、精制度为评价指标 ,研究大孔吸附树
· 3 ·
第10卷第6期
2004年12月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol . 10 ,No. 6
Dec. ,2004
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.脂纯化远志总皂苷的工艺条件与参数。
1 仪器与材料
6010紫外2可见分光光度计(安捷伦科技上海有
限公司) ,BP211D电子天平(德国赛多利斯股份有限
公司) ;远志药材为远志科植物远志 Polygala tenuifolia
Willd.的干燥根(2002年10月购于陕西省合阳县 ,经
成都中医药大学中药鉴定教研室万德光教授鉴定) ,去羟基远志皂苷元对照品(自制) ,纯度 > 98 %;D101、D201、 D301大孔吸附树脂(天津农药厂) ,D140、 D141A大孔
吸附树脂(晨光化工研究院) ;所用试剂均为分析纯
(成都化学试剂厂) 。
2 方法与结果
211 远志总皂苷含量测定
21111 对照品溶液的制备 精密称取去羟基远志
皂苷元对照品 5178mg ,置 10mL 量瓶中 ,用甲醇溶解
并稀释至刻度 ,摇匀 ,即得(每 1mL 含去羟基远志皂
苷元对照品01578mg) 。
21112 标准曲线的制备 精密吸取对照品溶液20、40、 60、 80、 100 μ L 于 5 支具塞磨口试管中 ,水浴加热
挥去溶剂 ,于每支试管中分别精密加入加110mL 5 %
香兰素试剂、 410mL 高氯酸 ,密塞 ,摇匀 ,于 60 ℃水浴
恒温加热15min ,取出后立即用冰水浴冷却2~3min ,于560nm波长处测定吸收度 ,随行试剂作空白参比 ,以吸收度 A 为纵坐标 ,去羟基远志皂苷元的质量
( μg)为横坐标 ,绘制标准曲线 ,并经回归处理 ,得回
归方程为 Y = 010172 X - 010073 ( r = 019994) ,说明吸
收度A与去羟基皂苷元质量在 11156~57180μg 范
围内有良好的线性关系(5 %香兰素试剂配制:称取
500 mg香兰素溶于 1010mL 冰醋酸中 ,即得 ,需新鲜
配制) ......
较多。本文以黄芪甲苷为指标 ,筛选黄芪的提取工
艺是合理的。
315 文献报导黄芪甲苷的含量测定方法较多,根据
样品的不同 ,处理方法各有差异。文中采用正丁醇
萃取 ,氨水试液洗涤 ,纯化效果较好 ,处理简单。适
用于含黄芪制剂的含量测定。
参考文献:
[1 ] 阴健 ,郭力弓.中药现代研究与临床应用(1) [M] .北京:
学苑出版社 ,1993. 592.
[2 ] 潘飞 ,冯毓秀.黄芪类药用植物皂苷类成分分析[J ] .中
国中药杂志 ,1995 ,20(7) :3912393.
[3 ] 钱广生 ,刘三康. HPLC测定黄芪注射液中黄芪甲苷的
含量[J ] .华西药学杂志 ,2002 ,17(1) :412421
[4 ] 汪红 ,王强. HPLC 2ELSD法测定黄芪及其注射液中黄芪
皂苷的含量[J ] .中国药学杂志 ,2002 ,37(4) :2982300.
[5 ] 方开泰. 均匀设计与均匀设计表[M] . 北京:科学出版
社 ,1994. 1491
大孔吸附树脂纯化远志总皂苷工艺研究
刘友平 ,万德光 ,鄢 丹 ,彭 成
(成都中医药大学 ,四川 成都 611730)
摘要:目的:研究大孔吸附树脂纯化远志总皂苷的工艺条件及参数。方法:以远志总皂苷的洗脱率、精制度为指标 ,考察大
孔吸附树脂对远志总皂苷的吸附性能和洗脱参数。结果:12mL远志总皂苷样品液(生药 0125g mL)上大孔吸附树脂柱(Φ15mm
×H90mm ,干重215g) ,用蒸馏水、 30 %乙醇、 70 %乙醇各3BV依次洗脱 ,远志总皂苷富集于70 %乙醇洗脱液部位。结论:通过大
孔吸附树脂富集与纯化 ,远志总皂苷洗脱率为8918 % ,精制度为23916 %。该法可较好地纯化远志总皂苷。
关键词:大孔吸附树脂;纯化;远志;总皂苷
中图分类号:R28316 文献标识码:B 文章编号:100529903 (2004) 0620003204
Studies on Purif ication of Saponins from Radix Polygalae with Macroporous Resin
LIU You2ping , WAN De2Guang , YAN Dan , PENG Cheng
( Chengdu University of TCM , Chengdu 610075 , China)
Abstract :Objectives : To study the technological parameters of purifying saponin with macroporous resin. Method :
With the elution rate and purity as indexes , the absorption characteristics and elution parameters were studied. Result : 12
mL of the extractive of Radix Polygalae (crude drugs 0125gP mL) was added on a column of macroporous resin (Φ15mm×
H 90mm , dry weight 215g) and was washed with 3BV of distilled water , 30 % ethanol and 70 % ethanol , successively.
Saponin was enriched in the 70 % ethanol elution. Conclusion : Enriched and purified by macroporous resin , the elution
rate of saponin was 8918 % and the purity reached 23916 %. So , the established method is feasible.
Key words :Macroporous resin ; Purification ; Radix Polygalae ; Saponins
远志为常用中药 ,始载于《神农本草经》 ,列为上
品。具有安神益智、祛痰、消肿之功 ,常用于心肾不
交引起的失眠多梦、健忘 ,惊悸、咳痰不爽、疮痈肿
毒、乳房肿痛等[1 ]。远志主要含有远志总皂苷、口山
酮、生物碱、糖及低聚糖酯、脂肪油等 ,其中远志总皂
苷为镇静、祛痰的有效部位[2 ]。本文对大孔吸附树
脂纯化远志总皂苷的工艺条件进行了研究。
收稿日期:2003211221
大孔吸附树脂是一类新型非离子型高分子化合
物 ,近年来在药学领域(特别是天然药物精制)中应
用日益广泛 ,成为纯化中药有效成分的一种有效方
法。已有利用大孔吸附树脂对中药黄芪、三七等皂
苷类成分纯化的报道[3 ,4 ]
,但未见对远志皂苷类成分
纯化的相关报道。影响其纯化效果的主要因素如树
脂类型、吸附容量、洗脱溶剂等常因纯化物质的理化
性质不同而有所不同[5 ]。本实验以吸附容量、洗脱
率、固形物量、精制度为评价指标 ,研究大孔吸附树
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第10卷第6期
2004年12月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol . 10 ,No. 6
Dec. ,2004
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.脂纯化远志总皂苷的工艺条件与参数。
1 仪器与材料
6010紫外2可见分光光度计(安捷伦科技上海有
限公司) ,BP211D电子天平(德国赛多利斯股份有限
公司) ;远志药材为远志科植物远志 Polygala tenuifolia
Willd.的干燥根(2002年10月购于陕西省合阳县 ,经
成都中医药大学中药鉴定教研室万德光教授鉴定) ,去羟基远志皂苷元对照品(自制) ,纯度 > 98 %;D101、D201、 D301大孔吸附树脂(天津农药厂) ,D140、 D141A大孔
吸附树脂(晨光化工研究院) ;所用试剂均为分析纯
(成都化学试剂厂) 。
2 方法与结果
211 远志总皂苷含量测定
21111 对照品溶液的制备 精密称取去羟基远志
皂苷元对照品 5178mg ,置 10mL 量瓶中 ,用甲醇溶解
并稀释至刻度 ,摇匀 ,即得(每 1mL 含去羟基远志皂
苷元对照品01578mg) 。
21112 标准曲线的制备 精密吸取对照品溶液20、40、 60、 80、 100 μ L 于 5 支具塞磨口试管中 ,水浴加热
挥去溶剂 ,于每支试管中分别精密加入加110mL 5 %
香兰素试剂、 410mL 高氯酸 ,密塞 ,摇匀 ,于 60 ℃水浴
恒温加热15min ,取出后立即用冰水浴冷却2~3min ,于560nm波长处测定吸收度 ,随行试剂作空白参比 ,以吸收度 A 为纵坐标 ,去羟基远志皂苷元的质量
( μg)为横坐标 ,绘制标准曲线 ,并经回归处理 ,得回
归方程为 Y = 010172 X - 010073 ( r = 019994) ,说明吸
收度A与去羟基皂苷元质量在 11156~57180μg 范
围内有良好的线性关系(5 %香兰素试剂配制:称取
500 mg香兰素溶于 1010mL 冰醋酸中 ,即得 ,需新鲜
配制) ......
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