川厚朴愈伤组织培养的初步研究.PDF
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2006年2月23日
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参见附件(76KB，3页)。
文章编号:1001 - 4829 (2004) 02 - 0228 - 03
收稿日期:2003 - 08 - 14
基金项目:四川省教育厅自然科学基础研究项目
作者简介:孙雁霞(1976 - ) ,女,硕士,成都大学生物工程系教
师。
川厚朴愈伤组织培养的初步研究
孙雁霞,林桂芸,王跃华,朱剑宏,万 萍
(成都大学生物工程系,四川 成都 610106)
摘 要:采用川厚朴顶芽、茎段、叶柄、叶片为外植体,采用正交设计研究不同激素及浓度组合对外植体的影响,筛选出最佳启动培
养基为B5 + 2 ,42D 310mg· L - 1
(单位下同) + NAA 015mg· L - 1。川厚朴顶芽为最佳取材外植体。继代培养基配方为B5 + 2 ,42D
310mg· L - 1
+ NAA 011mg· L - 1。
关键词:川厚朴;顶芽;叶片;茎段;组织培养
中图分类号:S7231132 文献标识码:A
Tissue culture of Magnoloia of f icinal ia Rehd et wils
SUN Yan2xia ,L IN Gui2yun ,WANG Yue2hua ,ZHU Jian2hong ,WAN Ping
(Department of Biological Engineering ,Chengdu University ,Chengdu 610106 ,China)
Abstract :Terminal bud ,stems ,stipe and leaf of Magnolia of f ici nalia Rehd et wils were used for explant1The effects of the different com2
bination and concent ration of plant growth regulators on induction were investigated by using orthogonal design method to find out the best
culture medium1The results showed the initiating medium was B5 + 2 ,42D310 + NAA110 ,the subculture medium was B5 + 2 ,42D310 +
NAA011 ,and the best explant was terminal bud1
Key words :Magnolia of f ici nalia Rehd et wils ;terminal bud ;leaf ;stipe stems ;tissue culture
川厚朴( Magnol ia of f icinal ia Rehd et wils)为
木兰科植物 ,是四川特产的一种名贵中药[1 ]
,属于
国家二级保护的珍稀濒危药用植物 ,主产区域有四
川、湖北、湖南等[2 ]。
川厚朴药材的有效成分主要是酚类物质及生物
碱。具有温中、行气、燥湿、祛痰之功 ,自古以来被视
为治疗消化器官疾病、镇静及缓解骨骼紧张之良
药[3 ]。
由于厚朴生长年限长 ,一般需要 15～20 年后才
可采皮入药 ,剥皮后植物即死亡。因此 ,厚朴中药资
源长期处于短缺状态。目前 ,探索利用组织培养技
术对厚朴进行培养和快速繁殖 ,分析其遗传物质特
征 ,无疑对野生药用植物遗传资源的保护和科学利
用具有较高的理论价值 ,对解决药品市场厚朴资源
有很好的前景。
1 材料与方法
111 材料
川厚朴采自四川省都江堰市虹口地区 ,以其顶
芽、茎段、叶片、叶柄为接种外植体。
112 方法
材料处理:选择生长健壮、无病虫害的单株 ,取
顶芽、当年生半木质化枝条、叶片;先用自来水冲洗
干净 ,洗衣粉、消洗灵浸泡 10 min ,流水冲洗 3 h ,取
其顶芽、带芽茎段、叶片、叶柄于无菌条件下 ,用 70
%乙醇消毒 30 s ,011 %升汞处理6 min (3 + 3 min) ,无菌水冲洗 3～5 次后供接种使用。
培养条件:培养温度(25 ±2) ℃,光照 1500～
2000 lx ,光照时间 12 h d。
初代培养:接种后 1 周内为暗培养 ,后转入光照
培养。采用3 因素3 水平正交试验设计L9 (33) 。基
本培养基为 WH、 B5 和 MS ,2 , 42D 的 3 个水平为
110、 210、 310mg· L - 1
,NAA 的 3 个水平为 0101、015、 110mg· L - 1 ......
收稿日期:2003 - 08 - 14
基金项目:四川省教育厅自然科学基础研究项目
作者简介:孙雁霞(1976 - ) ,女,硕士,成都大学生物工程系教
师。
川厚朴愈伤组织培养的初步研究
孙雁霞,林桂芸,王跃华,朱剑宏,万 萍
(成都大学生物工程系,四川 成都 610106)
摘 要:采用川厚朴顶芽、茎段、叶柄、叶片为外植体,采用正交设计研究不同激素及浓度组合对外植体的影响,筛选出最佳启动培
养基为B5 + 2 ,42D 310mg· L - 1
(单位下同) + NAA 015mg· L - 1。川厚朴顶芽为最佳取材外植体。继代培养基配方为B5 + 2 ,42D
310mg· L - 1
+ NAA 011mg· L - 1。
关键词:川厚朴;顶芽;叶片;茎段;组织培养
中图分类号:S7231132 文献标识码:A
Tissue culture of Magnoloia of f icinal ia Rehd et wils
SUN Yan2xia ,L IN Gui2yun ,WANG Yue2hua ,ZHU Jian2hong ,WAN Ping
(Department of Biological Engineering ,Chengdu University ,Chengdu 610106 ,China)
Abstract :Terminal bud ,stems ,stipe and leaf of Magnolia of f ici nalia Rehd et wils were used for explant1The effects of the different com2
bination and concent ration of plant growth regulators on induction were investigated by using orthogonal design method to find out the best
culture medium1The results showed the initiating medium was B5 + 2 ,42D310 + NAA110 ,the subculture medium was B5 + 2 ,42D310 +
NAA011 ,and the best explant was terminal bud1
Key words :Magnolia of f ici nalia Rehd et wils ;terminal bud ;leaf ;stipe stems ;tissue culture
川厚朴( Magnol ia of f icinal ia Rehd et wils)为
木兰科植物 ,是四川特产的一种名贵中药[1 ]
,属于
国家二级保护的珍稀濒危药用植物 ,主产区域有四
川、湖北、湖南等[2 ]。
川厚朴药材的有效成分主要是酚类物质及生物
碱。具有温中、行气、燥湿、祛痰之功 ,自古以来被视
为治疗消化器官疾病、镇静及缓解骨骼紧张之良
药[3 ]。
由于厚朴生长年限长 ,一般需要 15～20 年后才
可采皮入药 ,剥皮后植物即死亡。因此 ,厚朴中药资
源长期处于短缺状态。目前 ,探索利用组织培养技
术对厚朴进行培养和快速繁殖 ,分析其遗传物质特
征 ,无疑对野生药用植物遗传资源的保护和科学利
用具有较高的理论价值 ,对解决药品市场厚朴资源
有很好的前景。
1 材料与方法
111 材料
川厚朴采自四川省都江堰市虹口地区 ,以其顶
芽、茎段、叶片、叶柄为接种外植体。
112 方法
材料处理:选择生长健壮、无病虫害的单株 ,取
顶芽、当年生半木质化枝条、叶片;先用自来水冲洗
干净 ,洗衣粉、消洗灵浸泡 10 min ,流水冲洗 3 h ,取
其顶芽、带芽茎段、叶片、叶柄于无菌条件下 ,用 70
%乙醇消毒 30 s ,011 %升汞处理6 min (3 + 3 min) ,无菌水冲洗 3～5 次后供接种使用。
培养条件:培养温度(25 ±2) ℃,光照 1500～
2000 lx ,光照时间 12 h d。
初代培养:接种后 1 周内为暗培养 ,后转入光照
培养。采用3 因素3 水平正交试验设计L9 (33) 。基
本培养基为 WH、 B5 和 MS ,2 , 42D 的 3 个水平为
110、 210、 310mg· L - 1
,NAA 的 3 个水平为 0101、015、 110mg· L - 1 ......
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