·综 述·

    基金项目: 北京市科委重点实验室基金项目(953850700)。

    作者简介: 黄秀兰, 女, 1964 年9 月生, 博士研究生, 副教授, 北

    京中医药大学教育部中医内科重点实验室(北京 100700) ; 王伟,博士生导师, 单位同第一作者。

    葛根素抗动脉粥样硬化作用研究新进展 黄秀兰 王 伟

    关键词: 葛根素; 动脉粥样硬化; 药理作用; 综述

    中图分类号: R282171 文献标识码:A 文章编号: 100027156 (2004) 0220051203

    葛根素(puerar in, Pur)为豆科葛属植物葛的根中异黄

    酮的主要有效成分之一, 其化学名为 4′ , 72二羟基282B 2 D2葡

    萄糖基异黄酮, 分子式为C21H20O 9,M r 为416[1 ]。自从1992

    年批准上市以来, 人们对Pur 的研究一直比较活跃, 已发现

    其具有扩张冠状动脉、保护缺血心肌和抗心肌缺血再损伤、减少急性心肌梗塞面积等多种作用, 临床上主要用于冠心

    病、心绞痛、心肌梗塞等心血管疾病[2 ]。近年对Pur 的研究

    主要集中于抗动脉粥样硬化(athero sclero sis,A S)相关作用

    机制方面, 笔者对此作一综述。

    1 诱导增殖的血管平滑肌细胞凋亡

    血管 平 滑 肌 细 胞 ( vascular smoo th muscle cell,V SMC)增殖和表型改变是A S 及血管成形术后再狭窄的

    主要病理基础。寻找能够促进A S 中V SMC 凋亡的手段具

    有重要的临床意义。在5 种中药黄酮类化合物筛选实验中,首次发现Pur 能促进体外兔主动脉增殖的V SMC 凋亡[3 ]。

    张颖等[4 ]

    进一步研究发现, 10- 6

    、 10- 5

    和 5×10- 5

    mo l·L - 1

    Pur 诱导体外兔主动脉平滑肌细胞凋亡率分别为 2172%、8116%和 1313% , 说明Pur 具有促进V SMC 凋亡作用。为

    了弄清 Pur 促体外兔主动脉V SMC 凋亡与基因表达的关

    系[5 ]

    , 差异显示图谱出现一些仅在 Pur 组高表达而在对照

    组无表达的cDNA 片断, 将其序列与 Gene2 Bank 进行同源

    性比较, 证实其中3 个序列均与兔葡萄糖调节蛋白 94 基因

    (GRP94)高度同源。No r thern 杂交证实GRP94 在Pur 作

    用的V SMC 中高表达, 与差异显示图谱一致。灰度扫描分

    析, GRP94 在V SMC 中表达量与Pur 浓度成正比。由此表

    明, Pur 诱导V SMC 凋亡过程中上调了GRP94。通过组织

    原位杂交, 观察到该基因片断在兔斑块组织中表达水平增

    高[6 ]。由此筛选出来与V SMC 凋亡相关基因片段 GRP94

    可能是葛根素作用靶点之一, GRP94 在葛根素促进增殖

    V SMC 凋亡及斑块组织中表达均增高可能与应激有关。

    2 对血管内皮细胞的保护作用

    内皮细胞损伤在A S 的发病机制中起重要作用, 脂质

    过氧化是引起内皮细胞损伤的主要因素。体外培养人主动

    脉内皮细胞实验[7 ]

    显示, 使用联胺造成内皮细胞脂质过氧

    化损伤, 即刻或 30 m in 后加入 Pur, 可增加细胞对噻唑蓝

    (M TT)的摄取和减少乳酸脱氢酶(LDH)的释放, 同时可逆

    转联胺增加丙二醛(MDA )和血栓烷A 2 (TXA 2)含量的作

    用。提示: Pur 对脂质过氧化致内皮细胞的损害具有保护作

    用。石瑞丽等[8 ]

    采用N aCN 合并无糖培养基造成体外培养

    牛主动脉内皮细胞缺氧, 观察Pur 对缺氧性血管内皮细胞

    凋亡的影响。N aCN 致阳性细胞百分率为 59% , 分别经 0.

    5、 1 和 3 mmo l·L - 1

    pur 处理后, 阳性细胞百分率各为

    39%、 1519%和4. 0%。同时还发现, Pur 可浓度依赖性地降

    低细胞的Caspase 表达。说明Pur 对缺氧条件下的血管内

    皮细胞有保护作用, 且与抑制Caspase 表达有关。

    活化的血管内皮细胞可表达细胞间黏附分子21

    ( ICAM 21) , 白细胞通过其表面的配体与 ICAM 21 相互作

    用, 黏附于血管内皮细胞表面。在黏附过程中, 白细胞被活

    化能释放自由基、细胞因子并脱颗粒释放多种酶, 直接损伤

    内皮细胞。有研究表明[9 ]

    , Pur 能抑制血管内皮细胞表达

    ICAM 2 1。在含大鼠脑血管内皮细胞单层96 孔板内, 分别加入

    TN F2A100 U ·mL 2 1

    和 IL 21B25 U ·mL - 1

    诱导 24h; Pur

    25mg·mL 2 1

    预先与内皮细胞共同孵育30 m in, 再以TN F2A

    和 IL 21B诱导, 采用CELL 2EL ISA 法测 ICAM 21 的表达。结

    果表明, TN F2A和 IL 21B能诱导内皮细胞增加表达 ICAM 21,Pur 可抑制TN F2A和 IL 21B内皮细胞表达 ICAM 21。推测

    Pur 可通过抑制血管内皮细胞表达 ICAM 21, 使内皮细胞免受

    炎性因子的损伤, 从而保护内皮细胞的功能。

    李永红等[10 ]

    采用球囊剥脱大鼠主动脉内皮, 分别于术

    后 3、 7、 14 和 28 d 取主动脉, 通过组织学检查、放射免疫法

    和RT 2 PCR 检测内膜增生情况、血小板 GM P2140 数目及

    血管A T1 受体mRNA 的水平。结果发现, 50 mg·kg- 1

    .

    d

    - 1

    葛根素能使球囊损伤血管内皮时血小板表面的 GM P2

    140 在术后 3 d 较手术组明显减少, 且在术后 7 d 仍明显低

    于手术组, 说明葛根素能明显抑制球囊损伤血管内皮后的

    血小板活化, 推测术前应用葛根素可能会减少血栓形成的

    危险, 减少急性血管闭塞及再狭窄的发生率。此外还发现,葛根素对A T1 受体mRNA 的表达及内膜增生的程度无明

    显影响, 但可减少V SMC 的移行, 亦利于抗A S 作用。

    3 抗氧化作用

    随着对氧自由基认识的深入, 药物的抗氧化作用受到重

    · 15 · 山 西 中 医 2004 年 4 月第 20 卷第 2 期 SHANX I J O F TCM Ap r . 2004 Vo l . 20 No. 2

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.视。Pur 对氧自由基有清除作用, 并能预防性对抗H2O 2 和超

    氧阴离子引起的氧化损伤[11 ]。方放治等[12 ]

    报道,H2O 2 诱导无

    血清培养的小牛主动脉血管平滑肌细胞凋亡, Pur (≥10- 7

    mo l

    ·L - 1)可显著降低平滑肌细胞中凋亡细胞百分率, 并减少凋

    亡细胞DNA 断裂及其引起的平滑肌细胞坏死。结果提示,Pur 可对抗H2O 2 引起的无血清培养的血管平滑肌细胞凋亡

    及坏死。此外, Pur 降低血液黏度、血小板聚集程度等作用可

    能与其清除自由基的活性有关[13 ]。

    中发现大量氧化型低密度脂蛋白(O x2 LDL )。O x2 LDL

    能趋化单核细胞进入主动脉内膜, 单核细胞通过其特有的

    O x2 LDL 受体摄取O x2 LDL 变成泡沫细胞, 进而形成脂纹 ......