实验号 A B C D 总黄酮

    含量 %

    1 1 1 1 1 10. 23

    2 1 2 2 2 12. 36

    3 1 3 3 3 12. 77

    4 2 1 2 3 15. 93

    5 2 2 3 1 16. 11

    6 2 3 1 2 15. 16

    7 3 1 3 2 15. 74

    8 3 2 1 3 14. 73

    9 3 3 2 1 15. 56

    Ⅰj 35. 36 41. 92 40. 12 41. 90

    Ⅱj 47. 20 43. 20 43. 85 43. 26

    Ⅲj 46. 03 43. 49 43. 61 43. 43

    Ⅰj

    2

    1250. 33 1757. 29 1609. 61 1755. 61CT = 1837. 27

    Ⅱj

    2

    2227. 84 1866. 24 1922. 82 1871. 43

    Ⅲj

    2

    2118. 76 1891. 38 1901. 83 1886. 16

    Rj 11. 84 1. 57 3. 73 1. 53

    SSj 15. 58 0. 27 1. 55 0. 26

    表 4 方差分析表

    Tab 4 Analysis of standard deviati on

    方差来源 离差平方和 自由度 f 方差 Ms F值 显著性 P

    A 15. 58 2 15. 58 59. 92 3 3

    C 1. 55 2 1. 55 5. 96

    误差 SSe 0. 53 4 0. 13

    注: F0 . 05 (2, 4) = 6. 94, F0 . 01 (2, 4) = 18. 00 3 3为有极显著意义

    由表 4,表 5得出对蜂胶中总黄酮含量影响的主次顺序

    为 A >C >B >D。蜂胶总黄酮含量提高的提取工艺组合为

    A2B3C2D3 ,即用 8倍量的 75%乙醇提取 2次 ,每次 8h。考虑

    到 B,D两因素对提取结果中的总黄酮的含量影响较小 ,考虑

    到节省时间和节省乙醇用量的原则 ,故改选为用 6倍量乙

    醇 ,提取 6h的为宜。

    2 . 3 . 3 提取工艺验证试验 将 3份粉碎的生蜂胶 ,每份

    10g,按正交实验所得出的提取最佳条件试验 ,测得蜂胶总黄

    酮含量为 16 . 66% ,结果说明由正交实验得出的工艺条件是

    可靠的。

    3 结论

    3 . 1 本试验通过乙醇冷浸法 ,乙醇温浸提取法 ,乙醇超声提

    取法对蜂胶提取方法进行初步比较 ,试验结果表明 ,乙醇温

    浸提取蜂胶总黄酮含量较高。

    3 . 2 正交实验的方差分析表明蜂胶最佳提取工艺是用 6倍

    量 75%乙醇提取 2次 ,每次 6h。

    3 . 3 黄酮物质得率随提取温度的升高而提高 ,但是随温度

    升高、 加热时间的延长 ,提取液的颜色加深 ,黄酮物质被氧化

    破坏。蜂胶中含多种黄酮类、 芳香酸、 酯类、 萜类化合物 ,还

    含有氨基酸、 维生素及蜜蜂唾液中的酶类化合物。为了尽量

    保证蜂胶的生物活性 ,又不影响黄酮类物质的得率 ,将实验

    温度预定为 60℃。

    参考文献

    [ 1 ] 中华人民共和国农业部.无公害食品2 蜂胶质量标准 [ J ].中国

    养蜂, 2003, 54 (2) : 34.

    [ 2 ] 栾金水,王南舟,田路.蜂胶药理作用研究 [ J ].中药材, 2000,23 (6) : 346.

    [ 3 ] 王宗伟,黄兆胜. 209蜂胶药理作用 [ J ]. 国外医药2 植物药分

    册, 1997, 12 (4) : 151.

    [ 4 ] 国家药典委员会. 国家药品标准 (化学药品地方标准上升国

    家标准)第九册 [ S]. 2002, 3072 309.

    收稿日期: 20032 102 09

    关木通药材中马兜铃酸 A的药动学研究

    作者简介:田葆萍,女, 1976,硕士研究生, Tel : 03112 6265625

    通讯作者:张兰桐, Tel : (0311) 6266419, E2 mail : zhanglantong@263. net

    田葆萍1, 2

    ,张兰桐1

    ,袁志芳1

    ,崔晓红1

    ,刘红菊1

    (1. 河北医科大学药学院药物分析教研室,河北 石家庄 050017; 2.总装备部军

    事医学研究所,北京 9702信箱 15号,北京 100101)

    摘要:目的 采用高效液相色谱法测定血浆中马兜铃酸 A的浓度 ,研究小鼠灌胃给予关木通提取液后体内马兜铃酸 A的药动

    学特点。方法 采用 Diamonsil

    T M C18色谱柱 (250mm × 4 . 6mm, 5 μm) ,以甲醇 2 水 2 冰乙酸 (72∶27∶1)为流动相 ,流速 1 . 0mL·

    min

    - 1

    ,检测波长 315nm。小鼠按马兜铃酸 A 4 . 0mg·kg

    - 1

    灌胃给予关木通提取液后 ,经 HPLC法测定血浆药物浓度。结果

    马兜铃酸 A在 0 . 1098～3 . 66mg·L - 1

    的浓度范围内线性关系良好 ( r = 0 . 9998, n = 7) ,最低检测浓度为 0 . 0183mg·L - 1。马兜

    铃酸 A高、 中、 低 3种不同浓度的平均回收率及相对标准偏差分别为 97 . 07% (1 . 0% ) , 97 . 10% (1 . 1% )和 99 . 36% (0 . 8% ) ,该法的日内和日间精密度 RS D值均小于 9 . 3%。小鼠给药后 ,药动学房室模型为一室模型 ,主要药动学参数 T1 2 (ka) , T1 2 (ke) ,Tmax , AUC, Cmax , CL F(S) ,V F( c)分别为: 3 . 94, 16 . 29, 10 . 65min, 104 . 88 (mgL) ·min, 2 . 84mgL, 0 . 038mgkgmin (mgL) , 0 .

    · 731 · 中国现代应用药学杂志 2005年 4月第 22卷第 2期 Chin JMAP, 2005 Ap ril,Vol . 22 No . 2

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.89 (mgkg) (mgL)。结论 本实验建立了关木通药材中马兜铃酸 A血药浓度的 HPLC测定方法 ,阐明了马兜铃酸 A的药动

    学特征。

    关键词:高效液相色谱法;关木通;马兜铃酸 A;药动学

    中图分类号: R969 . 11 文献标识码:A 文章编号: 10072 7693 (2005) 022 01372 04

    Study on pharmacok i neti cs of ar istoloch i c ac id cau lis a risto loch iae M anshu riensis extracti on

    TI AN Bao2 p ing

    1, 2

    , ZHANG Lan2t ong

    1

    , YUAN Zhi2 fang

    1

    , et al ( 1 . School of Phar m acy, Hebei M edical Univer sity, Shiji2

    azhuang 050017, China; 2 . Institute ofM ilitary ofM edicine, Depart m ent of General Equi m ent , B eijing 100101, China) ......