收稿日期:2004 - 00 - 27

    基金项目:国家自然科学基金资助项目(39970910)

    作者简介:赵春杰(1960) ,男(汉族) ,吉林农安县人,在职博士,教授,Tel : (024) 13940533478 ,E - mail :zc jjljj @sina. com。

    文章编号: 1006 - 2858 (2004) 05 - 0381 - 04

    黄芪中重金属超临界 CO2 净化技术研究

    赵春杰1

    , 张晖芬1

    , 陈 静1

    , 陈英杰1

    , 罗 旭1

    , 杨宏伟2

    (11沈阳药科大学 药学院 ,辽宁 沈阳 110016 ; 21辽宁省药品检验所 ,辽宁 沈阳 110023)

    摘要: 目的 利用超临界 CO2 萃取技术净化黄芪中重金属。方法 a1 以二乙基二硫代氨基甲酸钠

    (DDTC)为金属络合剂 ,用超临界流体萃取技术净化药材中的重金属 ,并对萃取方案进行最优化。

    b1选择不同的混酸消化液完全消解药材后 ,以空气2乙炔火焰AAS法和氢化物发生 AAS法分别测

    定其中的铅(Pb) 、镉(Cd) ,以及砷(As) 、汞(Hg) 。c1 采用 UCTRONVX - ODS(250 mm ×416 mm ,5μm)色谱柱 ,以乙腈2水( V∶ V = 30∶ 70)为流动相 ,检测波长为 203 nm ,卡马西平为内标 ,测定黄

    芪中黄芪甲苷的含量。结果与结论 a1 确定了药材中重金属的最佳萃取条件。在最佳萃取条件

    下 ,重金属净化率达到 85 %以上;同时 ,中药材中的有效成分损失低于 5 %。b1建立了药材中金属

    元素和有效成分的含量测定方法 ,为正确评价中药材的质量奠定了基础 ,可用于正确评价净化前

    后药材的质量变化。

    关键词: 黄芪; 重金属; 超临界 CO2 萃取; 原子吸收分光光度法; 高效液相色谱法

    中图分类号: R 914 文献标识码: A

    随着国际社会对“开发利用天然药物”的急剧

    升温 ,给我国中医药带来了前所未有的好机遇。

    我国中药以其丰富的资源、独特的疗效越来越受

    到世界各国的青睐和重视 ,但是 20 世纪 90 年代

    以来发生了多起“中药中重金属超标事件”并被媒

    体报道[1 ]

    ,成为国际医药市场的热门话题 ,严重

    损害了中药的形象 ,给我国造成极大的经济损失。

    因此 ,对于药材中重金属净化技术的研究 ,引起了

    许多专家和学者的关注 ,并投身于净化技术的开

    发中:选择澄清剂沉淀中药水提液中的金属元素 ,如壳聚糖具有絮凝作用可精制中药水提液[2 ];利

    用树脂的离子富集作用或离子吸附的差异 ,去除

    提取液中的金属离子等。作者选择超临界 CO2

    流体萃取补益类药材黄芪中重金属的净化技术 ,获得了重金属低含量的中药材 ,而药材中的有效

    成分的相对含量变化不显著。

    1 仪器与试药

    HG— 9602 原子吸收分光光度计(附 Pb、 Cd、As、 Hg高性能空心阴极灯) 、 HG—9602 氢化物发

    生器、 HG—9602 数据工作站;硝酸、高氯酸、盐

    酸、过氧化氢为优级纯;硼氢化钾、铁氰化钾、硫

    脲、碘化钾、重铬酸钾、氢氧化钠为分折纯: Pb、Cd、 As、 Hg 的单元素标准溶液(1 000 mg· L - 1) ,购自国家标准物质研究中心。

    Shimadzu LC—10AT 高效液相色谱仪、 Shi2

    madzu SPD—10A 紫外检测器;NC—2000 中北色

    谱工作站;甲醇、正丁醇、氢氧化钠为分析;乙腈为

    色谱纯;内标物卡马西平、对照品黄芪甲苷均购自

    中国药品生物制品检定所。

    分析过程中所用水均为去离子水。

    黄 芪 ( Ast ragal us membranceus ( Fisch. )

    Bunge ,产地辽宁)饮片 ,沈阳药科大学生药教研室

    孙启时教授鉴定。

    CLJ — B —120 —35 —1 超临界萃取设备(沈阳

    东宇药物技术研究院超临界制造分公司)最高萃

    取压力: 50 MPa ;萃取缸容积: 015 L ;萃取温度:

    常温(约75 ℃) ,流体 ,CO2 (纯度φ> 90 %) 。

    2 样品处理

    211 样品消解

    黄芪饮片,粉碎,过 20 目筛。取 5 g ,精密称

    定,置具塞锥形瓶中,加混酸 HNO32HClO4 ( V∶ V =

    = 5∶ 1)

    [2 ]

    30 mL ,浸泡过夜。次日置于电热板上消

    化完全,定量转移置 50 mL 量瓶中,加水稀释至刻

    度,混匀,作为供试品液,同法操作空白。供试液直

    接测定元素 Pb、 Cd ;供试液经稀释测定元素As。

    取上述粉末 1 g ,精密称定 ,置 25 mL 试管

    第 21 卷 第 5 期

    2 0 0 4 年 9 月

    沈 阳 药 科 大 学 学 报

    Journal of Shenyang Pharmaceutical University

    Vol121 No15

    Sep. 2004 p1381

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.中 ,加硝酸 510 mL、双氧水 210 mL ,混匀 ,放置

    过夜。次日于 95 ℃水浴消化 2 h ,放冷。以水

    约 20 mL为溶剂定量转移于50 mL量瓶中 ,加

    K2CrO7 ( w = 2 %) 4、 5 滴 ,用水稀释至刻度 ,混

    匀 ,作为供试液 ,同法操作空白 ,测定元素 Hg。

    212 黄芪甲苷的提取方法

    取黄芪样品粉末 2 g ,精密称定 ,置索氏提取

    器中 ,加入甲醇 100 mL ,水浴(80 ℃) 提取 3 h。

    回收甲醇 ,残渣用 20 mL 水饱和正丁醇溶解 ,并

    转入分液漏斗中。用 NaOH( w = 1 %)溶液洗涤

    (5 mL ×3 次) ,再用正丁醇饱和水洗至中性 ,回收

    正丁醇 ,残渣用甲醇溶解 ,并定容于 5 mL 量瓶

    中。用微孔滤膜过滤 ,取滤 20μL 做 HPLC 分

    析 ,测定黄芪甲苷的含量。

    3 含量测定

    311 各元素测定条件选择

    调节仪器至各元素的最佳工作状态 ,Pb、 Cd、As、 Hg 的测定波长分别为 21714、 22818、 19317、25317 nm ,灯电流分别为 610、 310、 810、 110 mA ,其中 Pb、 Cd 采用空气2乙炔火焰原子吸收法测

    定;As、 Hg以氢化物发生原子吸收法测定[3 ]。各

    方法线性关系良好 ,精密度、回收率试验结果均满

    足定量要求。

    312 HPLC色谱条件

    色 谱 柱: UCTRONVX2ODS ( 250 nm ×

    416 mm , 5μm) ; 流动相: 乙 腈2水 ( V ∶V =

    30∶ 70) ;流速:110 mL· min - 1;检测波长:203 nm;

    灵敏度: 1100 AU V ;进样量: 20μL。以黄芪甲

    苷与卡马西平峰面积比 Y 对质量浓度ρ作线性

    回归 ,得回归方程为 Y = 01669 5ρ+ 21900 ×

    10 - 3

    ( r = 01999 8 , n = 5) ,质量浓度为 01100～

    01800 g· L - 1。高、中、低回收率分别为 9814 %、9114 %、 8513 % ,方法精密度试验 RSD = 118 %( n

    = 5) ......