利用木霉防治丹参根腐病的研究X

    曾华兰 , 叶鹏盛 , 李琼芳 , 江怀仲

    (四川省农业科学院 经济作物育种栽培研究所 , 四川 简阳 641400)

    摘要: 丹参根腐病是由腐皮镰刀菌侵染引起的一种土传病害 ,近年来在四川的田间发病株率平均为 10 %～30 % ,严

    重影响到丹参的产量和品质。采集不同生态环境的丹参根际土样进行分离 ,获得对腐皮镰刀菌有明显拮抗作用的

    哈茨木霉 T23、桔绿木霉 T56等一批菌株。田间试验表明 ,T23、 T56对丹参根腐病的防效分别为5213 %和5517 % ,与多菌灵的防效相当。

    关键词: 丹参根腐病; 木霉菌; 生物防治

    中图分类号: S567. 53 文献标识码: A 文章编号: 1000 - 2650 (2003) 02 - 0142 - 03

    丹参药用根部 ,是栽培面积较大的药材之一。

    在人工栽培条件下 ,由于药田生态环境中生物群落

    多样性差、丰富度低 ,病虫害优势种群突出 ,常常发

    生严重的病虫为害 ,影响到丹参植株的生长发育 ,导

    致药材产量下降 ,品质变劣。

    丹参根腐病是由腐皮镰刀菌[ Fusarium solani

    (Mart) App. et wollenw. ]引起的一种土传病害 ,近

    年来传播蔓延较快 ,感病后的丹参植株长势衰弱 ,严

    重时地上部枯死 ,根的木质部完全腐烂成黑褐色 ,产

    量显著降低 ,其外观性状和品质均不符合药用要求。

    对丹参根腐病的防治 ,一般化学农药难于有效 ,而且

    滥用化学农药还会造成农药残留污染 ,因此寻求有

    效的生物防治措施成为可持续发展的需要。

    木霉属真菌的某些种和菌株对镰刀菌具有较强

    的抗生活性 ,因而可用作生物防治的有益微生

    物[1 ,2 ]。本项研究从生长在不同生态环境的丹参根

    际土样中分离出了一批木霉菌株 ,通过室内拮抗试

    验和田间防病增产试验 ,筛选出了对丹参根腐病有

    较好防病作用的菌株。现将结果报道如下。

    1 材料与方法

    1. 1 丹参根腐病危害症状观察

    调查不同田块中丹参根腐病的发生情况 ,观察

    记载丹参根腐病株的植株及叶片生长情况 ,并取病

    株和健株的地下部分 ,观察其根系生长状况 ,根的木

    质部及维管束有无变色等。

    1. 2 丹参根腐病病原菌生物学特性观察

    从田间采集病株 ,在室内分离、纯化病原菌 ,鉴

    定、记录病原菌在 PSA 培养基上的培养性状 ,并在

    显微镜下观察分生孢子、厚垣孢子的形状和大小

    等[3 ]。

    1. 3 木霉菌株的分离

    1. 3. 1 土样来源

    2000～2001 年从峨眉山、简阳、南充等不同地

    区、不同生态环境的丹参根际 5～10 cm深度采集土

    样51 份 ,其中 ,平坝地区农田生境土样 39 份 ,峨眉

    山等野生生境土样 12 份。

    1. 3. 2 分离方法

    土样分离木霉采用稀释平板法[4 ]。将土样用

    清水稀释制成 1 ×10 - 3

    浓度的土壤悬浮液 ,接种于

    平板后 ,置 25 ℃培养 3 d ,按常规方法分离出木霉 ,并进行纯化培养 ,并根据培养性状进行鉴定[5 ]。

    1. 4 木霉对病菌的拮抗试验

    试验采用对峙培养法。将 015 mm2

    的木霉和

    腐皮镰刀菌菌丝块同时接入 9 cm 的 PDA 培养皿

    内 ,两者相距 510 cm ,设 3 次重复 ,以不接木霉菌为

    对照。将培养皿置于 25 ℃培养箱中 ,72 h 后 ,观察

    两者的生长情况。采用拮抗指数评价拮抗作用强

    度 ,拮抗指数分级标准为:1 级 ,木霉菌丝占据平皿

    100 %;2 级 ,木霉菌丝占据平皿 > 2 3 ;3 级 ,木霉菌

    丝占据平皿 > 1 3 , < 2 3 ;4 级 ,木霉菌丝占据平皿

    < 1 3 ;5 级 ,病原菌占据平皿 100 %。并挑取两菌落

    交界处的气生菌丝 ,在光学显微镜下观察拮抗机理。

    1. 5 木霉在田间防治丹参根腐病试验

    将筛选出的木霉菌株培养成米糠固体制剂。采

    用的培养基配方为:米糠 550 g ,木屑 275 g ,白糖 20

    g ,水 1000 mL ,装入玻璃瓶中消毒 2 h ,冷却后 ,接种

    木霉培养 5～7 d 备用。在田间试验时用米糠稀释

    第 21 卷 第 2 期

    2003年 6 月 四川农业大学学报

    Journal of Sichuan Agricultural University

    Vol . 21 No. 2

    J un. 2003

    X收稿日期: 2002 - 11 - 15

    基金项目: 四川省科技厅应用基础项目“利用益微生物治理土传病害的研究” ; 四川省农科院项目。

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.成不同倍数施用。

    田间试验于 2001 年在简阳云龙进行。设置木

    霉制剂 510 倍土壤窝施处理 ,用量为 10 kg 667 m2

    ,以多菌灵粉剂的 4000 mg kg 为对照 ,并设空白对

    照。随机排列 ,重复 3 次。播种丹参出苗后调查出

    苗数及丹参根腐病的发病情况 ,以各处理的丹参根

    腐病病指较空白对照的减退率计算出相对防效。并

    测定各处理的丹参实际产量。

    2 结果与分析

    2. 1 丹参根腐病危害症状

    近年来在四川的丹参根腐病田间的发病株率平

    均为 10 %～30 % ,重病田可达 50 %以上 ,严重影响

    到丹参的产量和品质 ......