第 2 】 卷 第 4期

    2 9 9 1埠 L 2月

    西 南 林 学 院 学 报

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    Vo1 .2l No 4

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    华 山松 对蚜 虫 及螨侵 害产生 的生化 响应

    伍建榕 ， 盛世 法 ， 卢 靖 ， 邱 东强 ， 赵 文学

    ( 1 . 西南林学 院 资源学院， 云南 昆明 6 5 9 2 2 4； 2 . 华宁县 林业局， 云南 华宁 6 5 2 8 0 0 )

    摘要： 对受蚜虫侵 害的华山松根、 茎、 叶的生化指标进行测定， 并与正常华山拯各指

    标对照， 姑果得出： 华山松受蚜虫或螨类侵害后， 其含糖量、 酚类物质含量比正常华

    山松低 ； 过氧化物酶和多酚氧化酶活性都 比正常华山松高， 受侵 害的华 山松与正常

    植株 同一器官相比较 ， 叶和根的变化较太， 茎的变化较小.

    美键词 ： 华 山松 ； 蚜虫； 多酚氧化酶； 过氧化物酶； 蒽酮比色法； 酚类物质

    中图分类号： s 7 9 1 . 2 4 1 . 0 7 文献标识码： A 文章编号： 1 0 1 1 3 . 7 1 7 9 ( ： ~ 0 1 ) 0 4 一 一0 5

    酶是细胞代谢 活动的基础 ， 植物受刺吸式口器蚜虫的危害后 . 导致植物组织发生特殊的

    代谢变化 ， 从而打乱正常代谢过程中过氧化物酶等的活动状况 ， 应用酶等的变化可以发现植

    物的抗虫性 ， 植物抗虫性表现为受基 因控制的遗传抗虫性和受环境影响的生态抗虫性两方

    面. 植物的抗性主要由遗传因素决定 . 但其抗虫表达和抗虫 幅度又受到环境因子的影响 环

    境 因子可影响植物的生化性质 ， 使植物不适合作为某种昆虫的寄主， 从而提高了植物的抗性

    水平 ， 本文通过多酚氧化酶等生化指标的测定 ， 进一步揭示植物抗虫变化的机制 ， 以指导抗

    性育种和害虫 的综合治理_ 1 J ，1 材料与方法

    1 . 1 供试材 料

    取 2 0年树龄受蚜虫侵害呈丛枝状华山松的根、 茎、 叶， 并设正常植株作为对照 .

    1 . 2 实验 方法

    1 . 2 . 1 过氧化物酶( P 0 D) 活性剐定【 2

    ( 1 )酶液的提取 称取正常的与受侵呈丛枝状的华山松树皮各 0. 5 g ， 放入在 一l 5℃下

    冷冻过的研钵 中， 加入适量 p H 5 . 8的磷酸缓冲液研戚匀浆 ， 将匀浆转入离心管中， 于 4 0 0 0

    转 m. m离心 1 2 ml n ， 上清液转入 l 0 容量瓶中 . 沉淀用磷酸缓冲液再 提取两次， 上清液离

    心后并人容量瓶中， 定容至刻度， 低温保存

    ( 2 )酶活性 的测定 酶活性测定的反应体系包括 2 . 7 p H 5， 8的磷 酸缓 和冲液，1 . 0m1 2 % o 2 ， 1 ， 0ml 0 . 0 5m o t d i n 3 愈刨木酚和 0 ， 3 r a l 酶液 . 用在沸水中加热 5 r a i n的酶液

    为对照， 分别做 3组重复实验 . 反应体系加入酶液后 ， 立 即于 3 7℃水浴中保温 1 5 r ai n， 然后

    收穗 日斯 ： 2 ∞O一1 1一∞

    基金项 目： 云南省应用基础研究基金 资助项 目( ) 9 8 0 晒8 M)

    作者简介： 伍建榕 ( 1 嗡 一) ， 女， 福 建清流， L， 预士 剐教授 . 主要从事森林病理学的教学 、 科研工作

    维普资讯 http:www.cqvip.com 西 南 林 学 院 学 报 第 2 】卷

    迅速转入冰浴中， 并加入 2 ， 0 mI 2 0 %三氯 乙酸终止反应 . 用 7 2 1 分光光度计在 4 7 0 n r n渡长

    下测定反应体系的吸光度 .

    1 . 2. 2 酚 类物质含 量测 定

    ( 1 )标准 曲线制作 0. 5 %邻苯二酚 0 ， 0 . I ， 0 . 2 ， 0 . 3 ， 0 . 4 ， 0. 5 ， 0 . 6 m1 分别加入 0 . 6 mI 4

    一

    氨基替 比林溶液， 2 0 mI 氨溶液 ， 2 mI 铁氰化钾溶液后加水定容到 1 0 0 mI ， 7 2 1分光光度计

    上用 4 9 2 r M 波 长处测定 吸光度 .

    ( 2 )酚类物质含量的测定 取各材料 1 0 g ， 加 2 0 mI 9 5 %乙醇磨成糊状 ， 放于 5 0 mI 容量

    瓶中， 残渣用蒸馏水洗涤后过滤， 合并滤液 ， 最后定容至 5 0 mI 供测定用 . 取 6个容量瓶， 分成

    两组 ， 分别加人两种样 品溶液 2 m l ， 然后各加入 0 . 6 m l 4一氨基替 比林溶液、 2 mI 氨溶液及

    2 mI 铁氰化钾溶液. 加水定容至 5 o mI ， 混匀， 于 4 9 2 m 波长处分别测定吸光光度 . 再在标准

    曲线上找出其相应 的浓度 ， 然后根据稀释倍数计算出华 山松的含 酚量.

    1 . 2 . 3 多酚氧化酶活性测定【 4 取 1 . 0 g材料 ， 剪碎， 加适量蒸馏水于冰冻过的研钵中研成

    匀浆 ， 转移至 2 5 mI 容量瓶 中， 用水洗涤研钵， 一并转入容量瓶中， 加水定容后混匀 . 取 6个滴

    定瓶 ， 分成两组( 正常与受侵株) ， 分别加入 以上悬 浮液 1 0 mI ， 各加入 p H 6. 4的磷酸缓 冲液

    1 . 0m 1 . ， 0 . 4M的抗坏血溶液 5 mI ， 0 . 2 %的邻苯二酚溶液 5 mI ， 准确振荡反应 5 m l n . 加人5m l

    5 %的正磷酸终止反应 ， 以 0 . 5 %淀粉溶液作为指示剂 ， 用 0 . 0 1 N的碘酸钾溶液滴定至蓝色

    刚好不消失为止 . 另取 2个滴定瓶 ， 分别加入 l 0 mI 的悬浮液( 正常与不正常) ， 顺序加入 5 mI

    5 %正磷酸 ， 5 ml 0. 4 M抗坏血酸作对照滴定 .

    1 . 2 . 4 舍糖量测定 J 蒽酮比色定糖法 取适量的样品烘干后磨碎 ， 将 2 O O r a g磨碎 的样

    品于锥形瓶中， 加人 1 5 mI 8 0 %酒精 ， 于 8 5 c 水浴中提取 3 0r a i n ， 收集滤液 ， 残渣用 8 0 %的适

    量酒精重复洗涤 2次 ， 转人离心管中 ， 以4 0 0 0转 m A n离心 1 2 r a i n ， 取上清液于 2 5 mI 容量瓶

    中用蒸馏水定容 . 取定容过的提取液各 0. 1 ， 0. 2 ， 0 . 3 m l 于 6支试管中， 加水至 1 ml 后置于冰

    水浴中 ......