怀牛膝组织培养的研究.PDF
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2006年2月23日
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参见附件(73KB，2页)。
3 治疗结果
用药后 ,患者周围神经病变症状有不同程度好转 ,其中
症状完全消失 8 例 ,大部分消失 19 例 ,症状减轻或好转 11
例 ,无效 5 例。显效率为 6218 % ,有效率 8814 %治疗期间患
者未出现毒副作用。
4 体会
糖尿病周围神经病变的病理基础一般认为是血管的循
环障碍及神经细胞代谢障碍所致。应用复方丹参注射液可
解除微血管痉挛 ,增加血流量 ,改善微循环及血流速度 ,降低
血液粘稠度 ,解除神经血管的微循环障碍。中医认为 , “久病
入络为血瘀”。消渴日久 ,瘀阻络脉 ,阻滞四末气血循环 ,筋
脉失养;内有燥热津亏 ,血液循环不畅 ,津液失于输布 ,故阴
虚燥热与血瘀相互作用、相互影响是糖尿病周围神经病变的
重要病理因素 ,故滋阴润燥清热 ,活血养血化瘀为其治则。
方中玄参、生地黄、麦冬、天花粉润燥清热滋阴;当归、川芎、牛膝、赤芍、白芍、桃仁重于养血活血化瘀。其中川芎具有活
血行气、散风止痛的作用 ,能旁通四肢外彻皮毛 ,既为活血之
主药又可助诸药直达病所;牛膝活血通络 ,性善下行 ,与川芎
相伍 ,下行上达 ,通行四末;更配用桃仁破血逐瘀 ,有“祛瘀生
新”之效;赤芍散瘀清热 ,白芍敛阴止痛 ,标本兼顾。脾主四
肢 ,山药补气健脾。阴血两亏 ,易受外风 ,故用黄芪、防风 ,补
气祛邪。诸药合用 ,共奏养阴润燥活血止痛之功。与复方丹
参注射液协同作用 ,故有较好效果。
(编辑:李 华)
怀牛膝组织培养的研究
董诚明 ,张丽萍 ,刘 杰
(河南中医学院 ,河南 郑州 450008)
关键词:怀牛膝;组织培养;外植体;愈伤组织;芽分化
中图分类号:R681. 8 文献标识码:B
文章编号:1003 - 5028 (2002) 04 - 0063 - 02
怀牛膝为苋科牛膝属植物牛膝(Achyranthes bidentata
BL. )的干燥根 ,主产河南沁阳、武陟等县。本品性甘、苦、酸、平 ,具有补肝肾、强筋骨、通血脉、降血压及镇痛等功效。
对怀牛膝的全面研究始于 60 年代 ,多集中于成分分析 ,药理
作用及栽培措施等方面的研究。利用不同器官作为外植体
进行组织培养的研究 ,尚未见相关报道 ,为了探索出一条利
用生物工程技术改造怀牛膝品质的途径 ,我们进行了探索性
的研究 ,现已从怀牛膝茎、叶等部位诱导出愈伤组织及芽分
化。
收稿日期:2002 - 04 - 17
作者简介:董诚明(1963 - ) ,男 ,汉族 ,内蒙古四子王旗人 ,学
士学位 ,讲师 ,从事药用植物教学及科研工作。
1 材料与方法
111 材料
供试材料为怀牛膝(Achyranthes bidentata BL. ) ,由武陟
县医药公司提供的 1999年产的新果实。
112 无菌苗
取种子100粒 ,用70 %的酒精浸3 秒 ,蒸馏水冲洗 ,再用
011 %升汞灭菌 3 min ,无菌水冲洗 5 次 ,在无菌条件下置不
附加任何激素的 MS固体培养基上进行培养。
113 培养基组合
基本培养基为 MS培养基 ,配制不同浓度和比例的 2 ,4
- D、 6 - BA组合 ,共 12 组。
M1～M6、 MS + 6 - BA0. 5 mg L + 2 ,4 - D(0 ,0. 5 ,1 ,1.
5 ,2 ,3) mg L ;M6～M12、 MS + 2 ,4 - D1. 5 mg L + 6 - BA(0 ,0. 5 ,1 ,1. 5 ,2 ,3) mg L。
114 培养条件和方法
培养温度为 25 ±2℃,光照强度 1500 Lux ,每日光照 10
～12 h ,接种后每天观察外植体形态变化及愈伤组织形成与
增殖动态。接种 7 d 时 ,统计形成愈伤组织块数 ,计算出每
种培养基的愈伤组织诱导率。
2 结果与讨论
211 不同的培养基对怀牛膝脱分化及诱导率的效应
利用无菌苗的茎、叶作为外植体 ,接种到不同组合的培
养基上 ,2 d 后部分叶、茎的外植体形态开始变化 ,边缘上翘
或中部隆起;4 d后 ,部分外植体在切口处开始形成淡黄色的
颗粒状愈伤组织 ,随着培养时间的延长愈伤组织面积逐渐增
大 ,颜色变化:淡黄绿色 →淡黄白色 →浅褐色。接种 10 d时
计算出不同组织的诱导率 ,不同浓度的 2 ,4 - D对怀牛膝愈
伤组织诱导的效应 ,结果见表 1。不同浓度 6 - BA对怀牛膝
愈伤组织诱导的效应 ,结果见表 2 ......
用药后 ,患者周围神经病变症状有不同程度好转 ,其中
症状完全消失 8 例 ,大部分消失 19 例 ,症状减轻或好转 11
例 ,无效 5 例。显效率为 6218 % ,有效率 8814 %治疗期间患
者未出现毒副作用。
4 体会
糖尿病周围神经病变的病理基础一般认为是血管的循
环障碍及神经细胞代谢障碍所致。应用复方丹参注射液可
解除微血管痉挛 ,增加血流量 ,改善微循环及血流速度 ,降低
血液粘稠度 ,解除神经血管的微循环障碍。中医认为 , “久病
入络为血瘀”。消渴日久 ,瘀阻络脉 ,阻滞四末气血循环 ,筋
脉失养;内有燥热津亏 ,血液循环不畅 ,津液失于输布 ,故阴
虚燥热与血瘀相互作用、相互影响是糖尿病周围神经病变的
重要病理因素 ,故滋阴润燥清热 ,活血养血化瘀为其治则。
方中玄参、生地黄、麦冬、天花粉润燥清热滋阴;当归、川芎、牛膝、赤芍、白芍、桃仁重于养血活血化瘀。其中川芎具有活
血行气、散风止痛的作用 ,能旁通四肢外彻皮毛 ,既为活血之
主药又可助诸药直达病所;牛膝活血通络 ,性善下行 ,与川芎
相伍 ,下行上达 ,通行四末;更配用桃仁破血逐瘀 ,有“祛瘀生
新”之效;赤芍散瘀清热 ,白芍敛阴止痛 ,标本兼顾。脾主四
肢 ,山药补气健脾。阴血两亏 ,易受外风 ,故用黄芪、防风 ,补
气祛邪。诸药合用 ,共奏养阴润燥活血止痛之功。与复方丹
参注射液协同作用 ,故有较好效果。
(编辑:李 华)
怀牛膝组织培养的研究
董诚明 ,张丽萍 ,刘 杰
(河南中医学院 ,河南 郑州 450008)
关键词:怀牛膝;组织培养;外植体;愈伤组织;芽分化
中图分类号:R681. 8 文献标识码:B
文章编号:1003 - 5028 (2002) 04 - 0063 - 02
怀牛膝为苋科牛膝属植物牛膝(Achyranthes bidentata
BL. )的干燥根 ,主产河南沁阳、武陟等县。本品性甘、苦、酸、平 ,具有补肝肾、强筋骨、通血脉、降血压及镇痛等功效。
对怀牛膝的全面研究始于 60 年代 ,多集中于成分分析 ,药理
作用及栽培措施等方面的研究。利用不同器官作为外植体
进行组织培养的研究 ,尚未见相关报道 ,为了探索出一条利
用生物工程技术改造怀牛膝品质的途径 ,我们进行了探索性
的研究 ,现已从怀牛膝茎、叶等部位诱导出愈伤组织及芽分
化。
收稿日期:2002 - 04 - 17
作者简介:董诚明(1963 - ) ,男 ,汉族 ,内蒙古四子王旗人 ,学
士学位 ,讲师 ,从事药用植物教学及科研工作。
1 材料与方法
111 材料
供试材料为怀牛膝(Achyranthes bidentata BL. ) ,由武陟
县医药公司提供的 1999年产的新果实。
112 无菌苗
取种子100粒 ,用70 %的酒精浸3 秒 ,蒸馏水冲洗 ,再用
011 %升汞灭菌 3 min ,无菌水冲洗 5 次 ,在无菌条件下置不
附加任何激素的 MS固体培养基上进行培养。
113 培养基组合
基本培养基为 MS培养基 ,配制不同浓度和比例的 2 ,4
- D、 6 - BA组合 ,共 12 组。
M1～M6、 MS + 6 - BA0. 5 mg L + 2 ,4 - D(0 ,0. 5 ,1 ,1.
5 ,2 ,3) mg L ;M6～M12、 MS + 2 ,4 - D1. 5 mg L + 6 - BA(0 ,0. 5 ,1 ,1. 5 ,2 ,3) mg L。
114 培养条件和方法
培养温度为 25 ±2℃,光照强度 1500 Lux ,每日光照 10
～12 h ,接种后每天观察外植体形态变化及愈伤组织形成与
增殖动态。接种 7 d 时 ,统计形成愈伤组织块数 ,计算出每
种培养基的愈伤组织诱导率。
2 结果与讨论
211 不同的培养基对怀牛膝脱分化及诱导率的效应
利用无菌苗的茎、叶作为外植体 ,接种到不同组合的培
养基上 ,2 d 后部分叶、茎的外植体形态开始变化 ,边缘上翘
或中部隆起;4 d后 ,部分外植体在切口处开始形成淡黄色的
颗粒状愈伤组织 ,随着培养时间的延长愈伤组织面积逐渐增
大 ,颜色变化:淡黄绿色 →淡黄白色 →浅褐色。接种 10 d时
计算出不同组织的诱导率 ,不同浓度的 2 ,4 - D对怀牛膝愈
伤组织诱导的效应 ,结果见表 1。不同浓度 6 - BA对怀牛膝
愈伤组织诱导的效应 ,结果见表 2 ......
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