第 2 2卷第 2期 2 0 0 3年 4月

    中 国 野 生 植 物 资 源 Chi n e s e W { c d Pl 口 n t Re s o ur c e s

    V0 1 . 2 2 No . 2

    Apr i l 200 3

    蒲公英过氧化物酶 ( POD) 同工酶的测定

    戚晓利 徐 秀芳 王维人

    ( 佳木斯大学， 黑龙江 佳木斯 1 5 4 0 0 7 )

    摘 要 采用聚丙烯酰胺垂直板凝胶 电泳方法， 对蒲公英不同器官、 不同生长期 P OD同工酶进行曩 I 定分析， 结果

    表明蒲公荚的 P 0D同工酶具有一定的器官特异性和稳定性。

    关t词 蒲公英 ； 不 同器官 ； P OD 同工酶

    蒲公英 ( ? ' a x a g u m mo n g o l i c u m Ha n d . 一 Ma z z .) 俗称婆婆丁、 步步丁、 勃勃丁等 ， 属菊科蒲公英属多

    年生草本植物 。 几千年来 ， 它一直是 民间普遍食用 的

    时令野菜 ， 随着人们对健康 的关注和对绿色保健食

    品的青睐 ， 世界范围内已掀起一股蒲公英热， 对蒲公

    英 的研究和报道也越来越多 。

    蒲公英不仅 具有丰 富的营养成分[ 1 q] ， 而且具

    有清热解毒 、 利尿散结、 和脾保肝、 抑菌抗病毒等功

    效[ . ] ， 关 于蒲 公英 的 洁肤 护 肤 品 的研 制也 有 报

    道[ 7 叫] ， 一些 实验对蒲公英所 含的超氧化物 歧化酶

    ( S OD) 、 P OD、 过 氧化氢 酶( C AT) 及 黄酮类 物质等

    进 行 研 究 ， 认 为 其 具 有 抗 氧 化 延 缓 衰 老 的 作

    用[ 8 钆 u ] ， 但是对 于蒲公英不 同器官 P OD同工酶 的

    研究尚未见报道。 笔者对蒲公英不同器官、 不同时期

    P OD 同工酶 进行测定 ， 分析 比较其 P OD同工酶谱

    特征 ， 为进一 步开发利用蒲公英 和探讨其抗氧化能

    力及抗氧化活性部位提供参考依据 。

    1 材料和方法

    1 . 1 材料

    2 0 0 1年 5月至 6月间 ， 在佳木斯大学校园内灌

    木林间 ， 采集野生 的蒲公英 ， 经处理作为供试材料。

    1 . 2 方法

    1 . 2 . 1 取 材 方 式及 样 品制 备

    随机采集营养生长期 ( 不具花蕾和花朵、 具 8至

    9片真 叶) 和生殖生长期 ( 具花蕾和花朵) 的蒲公英 ，用蒸馏水洗净 ， 吸水纸吸干水分， 分别按不同器官依

    次取样 、 编号 。 即营养生长期的根和叶分别为 1号和

    收稿 日期 ； 2 0 0 2 一O 9 —2 5

    基金项 目； 佳 木斯 大学校长基 金资助项 目

    2号 ； 生殖生长期的根 、 叶、 蕾和花分别为 3号 、 4号 、5号和 6号 。 样品的制备按徐秀芳等的方法进行 [ 1 。

    1 . 2 . Z 电泳

    聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 ， 分 离 胶 质 量 分 数 为

    7 . 5 ， 浓 缩胶 为 3 . 5 ， 恒压 3 0 0 V， 4 ℃冰 箱 内 电

    泳 ， 电极缓冲液为 p H8 . 3的 Tr i s — Gl y系统 。

    1 . 2 . 3 染 色

    采用醋酸联苯胺法染过氧化物酶同工酶， 待酶

    带显现清晰后 ， 用流水漂洗后置蒸馏水中保存 ， 按张

    相歧的方法记录 值[ 1 ， 拍照后制成千板保存 。

    2 结果

    2 . 1 基本谱型

    将营养生长期 和生殖生长期 的根 、 叶、 蕾 、 花各

    部位显现的酶带叠加 ， 形成蒲公英 P OD同工酶的基

    本酶谱 ( 图 1 ) 。由图 1知 ， 蒲公英 P oD同工酶共显

    现 6条酶带 ， 从负极 到正极依次划分为 A、 B、 C 3个

    区。A 区 R f =0 - -0 . 3 O ， 显现 Al 、 A2 两条酶带 ， B区

    R f一0 . 3 0 - -0 . 5 0 ， 共显 现 B l 、 B 2 、 B 3 这 3条酶带 ， C

    区 P , f =o . 5 0 ～1 . 0 0 ， 仅显现 C l 这 1 条较宽 的酶带 。

    可见 ， 蒲公英在取样期 内， P OD同工酶酶带数不多 。

    图 1 蒲公 英 P OD同工一基本 ■膏

    2 . 2 不同器官 POD同工酶的特征

    2 . 2 . 1 根 中 P OD 同工酶 .

    从电泳 图谱中可见 ， 营养生长时期根中 P OD同

    工酶酶带数最多 ， 共 6 条 ( 图 2 — 1 ) ， 即 A。 、 A。 、 B 。 、 B 2 、B 。 、 C 。 ， 与基本 酶谱一致 ， 但 B l 带活性较弱 ， 为痕迹

    维普资讯 http:www.cqvip.com 第 2 期 戚晓利等： 蒲公英过氧化物酶( P OD) 同工酶的测定 4 3

    带。而生殖生长期根中 P OD同工酶带数明显减少 ，仅有 B。 、 B 2 和 C 。 这 3条酶带( 图 2 — 3 ) 。 但 B 。 活性较

    强 ， 此期 A。 、 A 、 B 。 酶带消失 。

    + l 2 3 4 5 6

    ● l _ 一 _ j 口 目■ ‘ j j 圈 【 ： ：： ： 3 … …

    特曩带 次曩带 曩 带 弱带 痕迹带

    圈 2 蒲公英不 同部位 P OD同工 酶图谱

    2 . 2 . 2 叶 中 P OD 同工酶

    实验 的两个生长期 ......