牛黄上清片质量标准的研究

    方国民 任 军

    (上海海虹实业(集团)巢湖中辰药业有限公司 ,巢湖 238000)

    摘要 目的 对牛黄上清片的质量标准进行研究。方法 采

    用薄层色谱法对牛黄上清片中牛黄、冰片、黄连进行定性鉴

    别;采用高效液相色谱法测定大黄的有效成分大黄素、大黄酚

    的含量。结果 薄层色谱鉴别明显;大黄素线性范围为 215

    ～20 mg· L - 1

    ,回归方程 ^Y = 44218 ? X + 229156 ( r = 01999 9) ,精密度 RSD为 0174 %;大黄酚线性范围为 115～45 mg· L - 1

    ,回归方程 ^Y = [71105 ×106

    ] ? X - 2 3641294 ( r = 01999 8) ,精

    密度 RSD为 0178 %。结论 该方法简便 ,专属性强 ,重现性

    好 ,可作为牛黄上清片质量控制标准。

    关键词 牛黄上清片; TCL ;HPLC;质量标准

    牛黄上清片具有清热泻火、散风止痛的功效;临床常用于

    头痛眩晕 ,目赤耳鸣 ,咽喉肿痛 ,口舌生疮 ,牙龈肿痛 ,大便燥

    结等症 ,疗效确切。其质量标准收载于《卫生部药品标准中药

    成方制剂》第 8 册 ,标准中没有鉴别和含量测定项。为了更好

    地控制药品质量 ,故考虑增加几项 TLC鉴别 ,增加 HPLC法

    测定大黄素、大黄酚的含量。

    1 仪器与试剂

    高效液相色谱仪(美国科学仪器公司 , SSI 2PC3000 型 ,M500UV2VIS 检测器 ,ANASTAR 色谱工作站 ,ODSC18 416

    mm×250 mm) ;超声处理仪(上海 ,SB3200 型) ; Satorius电子

    分析天平(Satorius Co. Ltd. Germany) ;牛黄上清片(自制) ;黄

    连对照药材、大黄素、大黄酚、冰片、胆酸、盐酸小檗碱对照品

    均由中国药品生物制品检定所提供;甲醇为色谱纯;水为重蒸

    水;其余试剂均为分析纯。

    2 实验方法与结果

    2. 1 薄层色谱鉴别

    2. 1. 1 冰片的鉴别[ 1 ,2 ]

    取本品 4 片 ,去除包衣后 ,研细 ,加氯

    仿 20 ml ,超声处理 30 min ,滤过 ,滤液蒸干 ,加乙醇 1 ml使溶

    解 ,作为供试品溶液;取自制缺冰片的牛黄上清片 4 片 ,同法

    制得阴性对照溶液;另取冰片对照品 ,加乙醇制成每1 ml含1

    mg的对照溶液;取供试品溶液、阴性对照溶液、对照品溶液各

    2μl ,分别点于同一硅胶 G薄层板上 ,以环己烷 - 醋酸乙酯

    (17∶ 3)为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,喷以 5 %的香草醛硫酸溶

    液 ,加热到斑点显色清晰 ,供试品色谱中在与对照品色谱相应

    的位置上显相同颜色的斑点(图 1) 。

    2. 1. 2 牛黄的鉴别[ 1 ,2 ]

    取本品 4 片 ,去除包衣后 ,研细 ,加

    氯仿 20 ml ,超声处理 30 min ,滤过 ,将滤液蒸干 ,加乙醇 1 ml

    使溶解 ,作为供试品溶液;另取自制缺牛黄的牛黄上清片 ,同

    法制成阴性对照溶液;另取胆酸对照品适量 ,加乙醇制成每 1

    ml 含 1 mg的溶液 ,作为对照品溶液;照薄层色谱法(中国药

    典 2000年版一部附录 Ⅵ B)试验 ,吸取上述溶液各 5μl ,分别

    点于同一硅胶 G薄层板上 ,以正己烷 - 醋酸乙酯 - 醋酸 - 甲

    醇(20∶ 25∶ 2∶ 3)为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,喷以 10 %硫酸乙

    醇溶液 ,在 105 ℃加热约 10 min ,置紫外灯(365 nm)下检视 ,供试品色谱中 ,在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的

    荧光斑点(图 2) 。

    2. 1. 3 黄连的鉴别[ 1 ,3 ]

    取本品 4 片 ,研细 ,加甲醇 50

    ml ,超声处理30 min ,滤过 ,滤液作为供试品溶液;取自制缺黄

    连的牛黄上清片 ,同法制得阴性对照溶液;另取黄连对照药材

    011 g ,加甲醇 10 ml ,同法制成对照药材溶液;另取盐酸小檗

    碱对照品适量 ,加甲醇制成每 1 ml 含 1 mg 的对照品溶液 ......