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编号:10918069
灵芝的液体培养.PDF
http://www.100md.com 2006年2月23日


第1页

    参见附件(78KB,2页)。

    

    min - 1;检测波长:230nm;柱温:20° C。

    2. 2 对照品溶液的制备 精密称取芍药苷对照品 ,用甲醇

    配制成浓度为 0. 2mg· mL - 1

    的溶液。

    2. 3 供试品溶液的制备 分别准确称取赤芍、赤芍与地龙

    (1∶ 1) ,加 10 倍水 ,冷浸 1h ,同法回流提取 2 次 ,每次 1h ,提

    取液离心(4000r· min - 1) ,上清液制成每 1mL 含 0. 05g赤芍

    的溶液 ,各取 50mL ,加入处理好的 D2101A 大孔吸附树脂柱

    (12mm×12cm) ,用水洗至洗脱液为无色 ,弃去 ,再以 50 %乙

    醇洗脱 ,收集前 100mL ,即得。

    2. 4 标准曲线和线性范围 精密吸取一定体积芍药苷对照

    品液 ,注入液相色谱仪 ,测定峰面积 ,以进样量为横坐标 ,峰

    面积为纵坐标 ,绘制标准曲线 ,计算 ,得回归方程 Y = 1277X

    + 69 , r = 1. 000 ,表示芍药苷的进样量在 0. 2~2 μg 之间 ,与

    峰面积有良好的线性关系。

    2. 5 样品测定 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各

    5 μL ,注入液相色谱仪 ,测定峰面积 ,以外标法计算 ,结果见

    表 1。

    2. 6 精密度试验 精密吸取芍药苷对照品液 5 μL ,连续 5

    次进样 ,测得峰面积 , RSD = 0. 22 %;精密吸取样品供试液

    5 μL ,连续 5 次进样 ,得峰面积 , RSD = 0. 26 %。

    2. 7 加样回收率的测定 取样品溶液 25mL ,共 3 份 ,分别

    加入对照品溶液(1mg mL) 5mL ,余按 2. 3 项、 2. 5 项下方法

    制备、测定 ,结果平均加样回收率为 99. 1 % , RSD = 2. 1 %。

    表 1 赤芍单煎液和赤芍与地龙同煎液( + )中芍药苷的含量

    序号 单煎( %) 同煎( %) 下降百分比( %)

    1 4. 49 3. 44 23. 39

    2 3. 67 3. 24 11. 72

    3 3. 47 2. 76 20. 46

    4 4. 08 3. 43 15. 93

    5 4. 36 3. 75 14. 00

    结果:芍药苷平均下降17. 1 %。

    3 结论

    3. 1 从本实验的平均提得率来看 ,赤芍与地龙同煎液中芍

    药苷含量明显下降 ,表明赤芍与地龙同煎后 ,其中的芍药苷

    受到影响。可能是芍药中的鞣质同地龙中的蛋白质相互作

    用影响了芍药苷的溶出 ,也可能是地龙中的嘌岭类物质产生

    的影响 ,有待于进一步研究。

    3. 2 从色谱图来看 ,单煎与同煎液的峰的形状与数量有变

    化 ,提示其化学成分有所改变。

    赤芍单煎液 赤芍与地龙同煎液

    灵芝的液体培养

    王 兰1

    , 杨朝鲜2

    , 周 玲3

    (1.泸州医学院生物教研室;2.泸州医学院解剖教研室;3.泸州医学院附院内分泌科 ,四川 泸州 646000)

    收稿日期:2003205210

    作者简介:王 兰(1970~) ,女,四川泸州人,硕士,讲师,从事干细胞、中药栽培。电话:083023160506。

    关键词:灵芝;液体培养;产量

    中图分类号:R282. 6 文献标识码:B 文章编号:100121528 (2004) 0420336201

    灵芝是一种名贵中药 ,属担子菌纲、多孔菌目、多孔菌

    科、灵芝菌属。近年研究表明灵芝含有能提高人体免疫能

    力、具有抗肿瘤活性的灵芝多糖 ,所以灵芝具有抗癌、延缓衰

    老、镇静止痛和护肝等功效[ 1 ]

    ,且毒性极低[ 2 ]。灵芝的子实

    体和菌丝体在药用价值方面相同 ,目前我国主要从灵芝子实

    体中提取灵芝多糖 ,人工栽培子实体生产周期长 ,生产力低

    下 ,而采用液体发酵法 ,工业化生产灵芝菌丝体和灵芝多糖

    可缩短生产周期 ,大大提高灵芝多糖的生产能力 ......

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