五味子质量标准的研究.PDF
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2006年2月23日
| 第1页 |
参见附件(76KB，2页)。
五味子质量标准的研究
张林疆1
,刘唯芬2
,毕开顺2
,王 群3
,张 良3
(11沈阳协合集团有限公司 ,辽宁 沈阳 110003 ; 21沈阳药科大学 ,辽宁 沈阳 110016 ;
31沈阳市苏家屯区卫生监督所 ,辽宁 沈阳 110101)
摘 要:建立了用高效液相色谱法测定29 种不同产地的五味子药材中有效成份的含量测定方法。分别用内
标法测定了药材中五味子醇甲的含量 ,在内标法中 ,检测波长为250nm ,流动相为甲醇∶水(45∶ 55 v v) ,流速为 1ml
min ,以联苯双酯做内标。本法准确可靠 ,为更好的控制五味子药材的内在质量 ,提供了科学依据。
关键词:北五味子;南五味子;高效液相色谱法;五味子醇甲;五味子甲素
中图分类号:R28411 文献标识码:B 文章编号:1008 - 4231(2004) 03 - 0219 - 02
收稿日期:2003 - 11 - 25
作者简介:张林疆(1967 - ) ,男,陕西韩城人,高级工程师,硕士研究生,研究方向:天然药物化学与中药的新药开发。
五味子为木兰科多年生落叶木质藤本植物北五
味子 Schisandra chinensis Baill 和南五味子(华中五味
子) S . sphenanthern Rehd et Wils 的成熟干燥的果实。
五味子具有敛肺滋肾、生津敛汗、涩精止泻、宁心安
神的功效。其药用历史悠久 ,我国最早的本草丛书
———《神农本草经》对其就有记载 ,是中医常用的药
材。北五味子为传统使用的正品药材 ,主产于东北、内蒙古、河北等地 ,在朝鲜和日本的长野县和北海道
也有分布 ,而南五味子出产于陕西、河南、甘肃、四川
及华东等地方[1 ]。目前 ,对北五味子中有效成份的
研究 ,已报道的有比色法[2 ]
、薄层层析比色法[3 ]
,及
多用 HPLC法进行复方制剂研究的报道 ,还未见用
HPLC法进行南、北五味子综合研究的报道。由于
五味子为一种常用药材 ,为了更有效地控制其内在
质量 ,从而保证其制剂的内在质量及其稳定性 ,我们
用 HPLC法建立了五味子药材中五味子醇甲和五味
子甲素的含量测定的方法 ,分别用外标法和内标法
测定了 29 个不同产地的五味子药材中五味子醇甲
和五味子甲素的含量 ,为有效控制五味子的内在质
量提供了科学依据。
1 样品收集及预处理
本研究收集了29个不同产地的五味子样品 ,样
品经沈阳市药品检验所的王为宁老师鉴定来源、产
地及含量。
样品处理:药材经60℃干燥、粉碎 ,过100目筛 ,置于广口瓶中 ,室温下密闭保存。
2 仪器 试剂与药品
仪器:Beckman 166 型高效液相色谱仪 ,美国
Beckman公 Beckman 140 型紫外检测器 ,美国 Beck2
man公司;Goldstar色谱工作站 ,美国Beckman公司。
试剂:乙腈(色谱纯) ,天津四友生物医学技术公
算出山楂总黄酮的含量。结果 ,见表1。
表1 不同提取方法山楂总黄酮含量测定
不同提取条件 吸收度(A) 总黄酮含量( %)
水提 01115 3173
具核
60 %乙醇 01295 9139
水提 01287 9114
无核 30 %乙醇 01347 11103
60 %乙醇 01448 14121
90 %乙醇 01232 7141
结论:由上表可见 ,60 %醇提无核山楂总黄酮含
量最高 ,故采用60 %乙醇提取设计正交实验。
4 山楂提取工艺正交实验设计[ 5]
称取无核山楂 30g ,置 500ml 圆底烧瓶中 ,按照
山楂提取正交设计因素水平 ,见表2 ,用60 %乙醇采
表2 山楂提取正交设计因素水平
水平 因 素
A溶媒量 B提取时间 C提取次数
1 6 1 1
2 8 2 2
3 10 3 3
用L9 (34)正交表设计实验 ,提取液趁热抽滤 ,滤液置
水浴锅上蒸发至干 ,用 60 %乙醇溶解 ,稀释至约
200ml ,加少量高岭土助溶 ,离心至沉淀完全 ,除去沉
淀 ,蒸发至干 ,用60 %乙醇溶解并定容至100ml 容量
瓶中 ,精密吸取30ml ,采用大孔吸附树脂除杂洗脱 ,先用水冲洗杂质 ,后用 60 %乙醇溶液洗脱 ,洗脱液
定容至250ml 容量瓶中 ,测定。
结论:对山楂总黄酮含量进行 F检验 ,C因素具
有高度统计意义 ,综合直观分析确立其最佳工艺为:
A2B2C3。即8倍量60 %乙醇回流提取2h ,3次。
5 结果与结论
黄酮类化合物易溶于甲醇、乙醇、醋酸乙酯、乙
醚等有机溶剂 ,所以有机溶剂提取效率明显高于水
提取。通过对不同提取工艺比较 ,采用 60 %乙醇提
取山楂 ,其总黄酮含量均为最高 ,通过正交实验优选
山楂最佳提取工艺为采用 8 倍量、 60 %乙醇提取 3
次 ,每次2h。以芦丁为标准品 ,采用紫外可见分光
光度法测定山楂总黄酮含量。
本实验采用大孔吸附树脂对山楂提取液进行分
离精制 ,达到去除杂质 ,提高有效成分含量的目的 ,符合工业大生产的要求 ......
张林疆1
,刘唯芬2
,毕开顺2
,王 群3
,张 良3
(11沈阳协合集团有限公司 ,辽宁 沈阳 110003 ; 21沈阳药科大学 ,辽宁 沈阳 110016 ;
31沈阳市苏家屯区卫生监督所 ,辽宁 沈阳 110101)
摘 要:建立了用高效液相色谱法测定29 种不同产地的五味子药材中有效成份的含量测定方法。分别用内
标法测定了药材中五味子醇甲的含量 ,在内标法中 ,检测波长为250nm ,流动相为甲醇∶水(45∶ 55 v v) ,流速为 1ml
min ,以联苯双酯做内标。本法准确可靠 ,为更好的控制五味子药材的内在质量 ,提供了科学依据。
关键词:北五味子;南五味子;高效液相色谱法;五味子醇甲;五味子甲素
中图分类号:R28411 文献标识码:B 文章编号:1008 - 4231(2004) 03 - 0219 - 02
收稿日期:2003 - 11 - 25
作者简介:张林疆(1967 - ) ,男,陕西韩城人,高级工程师,硕士研究生,研究方向:天然药物化学与中药的新药开发。
五味子为木兰科多年生落叶木质藤本植物北五
味子 Schisandra chinensis Baill 和南五味子(华中五味
子) S . sphenanthern Rehd et Wils 的成熟干燥的果实。
五味子具有敛肺滋肾、生津敛汗、涩精止泻、宁心安
神的功效。其药用历史悠久 ,我国最早的本草丛书
———《神农本草经》对其就有记载 ,是中医常用的药
材。北五味子为传统使用的正品药材 ,主产于东北、内蒙古、河北等地 ,在朝鲜和日本的长野县和北海道
也有分布 ,而南五味子出产于陕西、河南、甘肃、四川
及华东等地方[1 ]。目前 ,对北五味子中有效成份的
研究 ,已报道的有比色法[2 ]
、薄层层析比色法[3 ]
,及
多用 HPLC法进行复方制剂研究的报道 ,还未见用
HPLC法进行南、北五味子综合研究的报道。由于
五味子为一种常用药材 ,为了更有效地控制其内在
质量 ,从而保证其制剂的内在质量及其稳定性 ,我们
用 HPLC法建立了五味子药材中五味子醇甲和五味
子甲素的含量测定的方法 ,分别用外标法和内标法
测定了 29 个不同产地的五味子药材中五味子醇甲
和五味子甲素的含量 ,为有效控制五味子的内在质
量提供了科学依据。
1 样品收集及预处理
本研究收集了29个不同产地的五味子样品 ,样
品经沈阳市药品检验所的王为宁老师鉴定来源、产
地及含量。
样品处理:药材经60℃干燥、粉碎 ,过100目筛 ,置于广口瓶中 ,室温下密闭保存。
2 仪器 试剂与药品
仪器:Beckman 166 型高效液相色谱仪 ,美国
Beckman公 Beckman 140 型紫外检测器 ,美国 Beck2
man公司;Goldstar色谱工作站 ,美国Beckman公司。
试剂:乙腈(色谱纯) ,天津四友生物医学技术公
算出山楂总黄酮的含量。结果 ,见表1。
表1 不同提取方法山楂总黄酮含量测定
不同提取条件 吸收度(A) 总黄酮含量( %)
水提 01115 3173
具核
60 %乙醇 01295 9139
水提 01287 9114
无核 30 %乙醇 01347 11103
60 %乙醇 01448 14121
90 %乙醇 01232 7141
结论:由上表可见 ,60 %醇提无核山楂总黄酮含
量最高 ,故采用60 %乙醇提取设计正交实验。
4 山楂提取工艺正交实验设计[ 5]
称取无核山楂 30g ,置 500ml 圆底烧瓶中 ,按照
山楂提取正交设计因素水平 ,见表2 ,用60 %乙醇采
表2 山楂提取正交设计因素水平
水平 因 素
A溶媒量 B提取时间 C提取次数
1 6 1 1
2 8 2 2
3 10 3 3
用L9 (34)正交表设计实验 ,提取液趁热抽滤 ,滤液置
水浴锅上蒸发至干 ,用 60 %乙醇溶解 ,稀释至约
200ml ,加少量高岭土助溶 ,离心至沉淀完全 ,除去沉
淀 ,蒸发至干 ,用60 %乙醇溶解并定容至100ml 容量
瓶中 ,精密吸取30ml ,采用大孔吸附树脂除杂洗脱 ,先用水冲洗杂质 ,后用 60 %乙醇溶液洗脱 ,洗脱液
定容至250ml 容量瓶中 ,测定。
结论:对山楂总黄酮含量进行 F检验 ,C因素具
有高度统计意义 ,综合直观分析确立其最佳工艺为:
A2B2C3。即8倍量60 %乙醇回流提取2h ,3次。
5 结果与结论
黄酮类化合物易溶于甲醇、乙醇、醋酸乙酯、乙
醚等有机溶剂 ,所以有机溶剂提取效率明显高于水
提取。通过对不同提取工艺比较 ,采用 60 %乙醇提
取山楂 ,其总黄酮含量均为最高 ,通过正交实验优选
山楂最佳提取工艺为采用 8 倍量、 60 %乙醇提取 3
次 ,每次2h。以芦丁为标准品 ,采用紫外可见分光
光度法测定山楂总黄酮含量。
本实验采用大孔吸附树脂对山楂提取液进行分
离精制 ,达到去除杂质 ,提高有效成分含量的目的 ,符合工业大生产的要求 ......
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