茵陈的 HPLC指纹图谱研究

    邓湘昱 , 孙国祥

    (沈阳药科大学药学院 ,辽宁 沈阳 110016)

    收稿日期:2004202220

    基金项目:国家药典委员会中药注射剂指纹图谱项目

    作者简介:邓湘昱(1973～) ,女,湖南沅陵人,硕士,主管药师,从事药物分析工作。通讯联系人:孙国祥。

    关键词:HPLC;指纹图谱;茵陈;色谱指纹图谱指数;色谱指纹图谱相对指数

    摘要:目的:建立茵陈的 HPLC指纹图谱 ,为茵陈的质量控制提供新方法。方法:采用反相高效液相色谱法 ,Kromasil ODS

    色谱柱(250 mm× 4. 6 mm,5μm) ,流动相为1 %醋酸水2甲醇溶剂系统 ,线性梯度洗脱 ,检测波长326 nm,柱温30 ℃,进样量

    5μ L。以相似度和色谱指纹图谱指数鉴别药材质量 ,以指纹成分表观百分含量定量评价药材中各指纹成分含量高低。

    结果:建立了茵陈药材的 HPLC指纹图谱 ,以绿原酸峰为参照物峰 ,确定了22个共有峰 ,测定了不同产地茵陈 HPLC指纹

    图谱与共有模式间的相似度。结论:所建立的 HPLC指纹图谱具有较好的精密度和重现性 ,适用于茵陈药材的质量控

    制。

    中图分类号:R284. 1 文献标识码:A 文章编号:100121528 (2005) 0320253204

    HPLC f ingerprints of Herba Artemisiae scopariae

    DENG Xiang 2yu , SUN Guo2xiang

    ( College of Pharmacy , Shenyang Pharmaceutical University , Shenyang 110016 , China)

    KEY WORDS: high performance liquid chromatography ; fingerprint ; Herba Artemisiae scopareiae ; chromatographic fin2

    gerprint index ; chromatographic fingerprint relative index

    ABSTRACT: AIM: A novel method for the overall quality control of Herba Artemisiae scopareiae has been established

    by HPLCfingerprint . METHODS: The chromatographic fingerprints were obtained by injecting 5μ L of the sample solu2

    tion each time on a Kromasil ODS column (250 mm× 4. 6 mm ,5μm) with the gradient elution solvent system composed

    of 1 %acetate acid2water2methanol . The flow rate was 1 mLP min , the column temperature was maintained at 30 ℃and

    the detection wavelength was set at 326 nm. RESULTS :22 co2 possessing peaks were selected as the fingerprint peaks of

    Herba Artemisiae scopareiae and the similarities between the chromatographic fingerprints of the herbal drugs were calcu 2

    lated taking chlorogenic acid peak as the reference peak. The chromatographic fingerprints also were evaluated by the

    chromatographic fingerprint index (F) , the relative index (Fr) and the fingerprint components apparent prercentage cont2

    ents (P %) . CONCLUSION: This method with good precision and reproducibility can be useful in the quality control of

    Herba Artemisiae scopareiae.

    茵陈是菊科植物滨蒿 Artemisia scoparia Waidst . et KiL.或

    茵陈蒿 Artemisia capillaris Thunb.的干燥地上部分。其味苦、辛 ,性微寒 ,归脾、胃、肝、胆经 ,具有清湿热 ,退黄疸的功能 ,用于黄疸尿少 ,湿疮瘙疗 ,传染性黄疸型肝炎[1 ]。其化学成

    分主要包括香豆素类、色原酮类、黄酮类、香豆酸及其它有机

    酸类、挥发油等[2 ]。目前 ,茵陈药材及其制剂的液相色谱质

    量控制方法多以一个或几个有效成分的含量测定为主[3～4 ]。

    指纹图谱是一种以现代分析技术为依托的新的中药质量控

    制模式[5 ]

    ,是目前国际上公认的控制中药质量的最理想的技

    术。本实验采用反相高效液相色谱法建立茵陈的指纹图谱 ,对不同产地茵陈质量进行评价。

    1 实验部分

    1. 1 仪器与试剂

    Agilent 1100型液相色谱仪(配有二极管阵列检测器、四

    元梯度泵、在线脱气装置、自动进样器) ,ChemStation 工作站

    (Agilent科技有限公司) 。绿原酸(供含量测定用 ,中国药品

    生物制品检定所) ,茵陈药材(西安高科陕西金方药业公司和

    陕西金麒麟药业有限公司提供 ,药材经笔者鉴定均为药典收

    352

    2005年3月

    第27卷 第3期

    中 成 药

    Chinese Traditional Patent Medicine

    March 2005

    Vol . 27 No. 3

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.载品种绵茵陈 ,产地见表2) 。甲醇(色谱醇 ,山东禹王实业总

    公司) ,冰醋酸(色谱纯 ,天津市科密欧化学试剂开发中心) ,其它试剂均为分析纯 ,所用水为去离子水。

    1. 2 参照物溶液的制备 精密称取绿原酸对照品28. 0 mg ,用20 %(V V)甲醇水溶解并定容至100 mL ,摇匀即得。

    1. 3 供试品溶液的制备

    取不同产地干燥茵陈药材适量 ,精密称取混合均匀的药

    材约5 g ,分别加水100 mL ,回馏提取2 次 ,合并提取液并浓缩

    至20 mL ,加乙醇适量 ,冷处避光放置24 h ,滤除沉淀 ,减压回

    收乙醇 ,再用水稀释并定容至50 mL。HPLC分析前用0. 45μm

    滤膜过滤。

    1. 4 色谱条件

    色谱柱: Kromasil ODS(25 cm×4. 6 mm,5μm) 。流动相:

    A ,1 %醋酸水溶液; B ,甲醇。线性梯度洗脱: 0～30 min ,20 %B ; 30～70 min ,20 %～55 %B。流速 : 1 . 0mL· min

    - 1。

    柱温:30 ℃。进样量:5μ L。紫外检测波长:326 nm。

    图1 10批茵陈药材的指纹图谱 ......