收稿日期: 2004 - 04 - 22 ; 修回日期: 2004 - 05 - 27

    基金项目: 广东省佛山市产学研专项资金立项项目 (2003S22)

    作者简介: 龚盛昭 (1970 - ) , 男, 湖南江永人, 副教授, 在读博士, 电话: (020) 34300946 , E - mail : shengzhao2002 @sina1com。

    微波提取当归美白成分的工艺研究

    龚盛昭1 ,2

    , 杨卓如2

    , 黄锦常1

    (11广东轻工职业技术学院 轻化工程系 , 广东 广州 510300 ;

    21华南理工大学 化工学院 , 广东 广州 510640)

    摘要: 以提取物产率及其对酪氨酸酶的相对抑制率为评价指标 , 进行了当归美白成分的微波辅助提取工艺

    研究。得到了较佳提取工艺条件: 以体积分数为90 %的乙醇为提取剂 , 乙醇与当归的质量比为 8∶ 1 , 微波

    450 W提取5 min , 同样条件重复提取1次。合并提取液经活性炭脱色、真空浓缩、真空干燥后即得提取物

    浸膏 , 产率为4615 % , 对酪氨酸酶的相对抑制率为 7318 %。与直接加热提取法相比较 , 微波辅助提取能

    缩短提取时间 , 并能提高提取物产率及其对酪氨酸酶的相对抑制率。

    关键词: 美白剂; 当归; 微波辅助提取; 酪氨酸酶

    中图分类号: TQ658 文献标识码: A 文章编号: 1001 - 1803(2004) 05 - 0335 - 03

    酪氨酸酶普遍存在于人和动植物体内 , 是黑色素

    生物合成过程中必不可少的关键酶。酪氨酸酶的合成

    和催化活力的升高 , 使体内黑色素合成增多 , 导致色

    斑及黑色素瘤的形成。研究表明: 可通过抑制酪氨酸

    酶活力来预防和治疗色素沉着及黑色素瘤 , 因此寻找

    有效且对人体无毒副作用的酪氨酸酶抑制剂已成为药

    学和化妆品行业研究的趋向。当归是我国的传统中

    药 , 其主要成分为挥发油和有机酸 , 有机酸成分主要

    是阿魏酸 (4 - 羟基 - 3 - 甲氧基苯丙烯酸) 。根据杨

    柳依等[1 ]

    报道 , 具有 4 - 羟基 - 3 - 甲氧基苯基结构

    的物质对酪氨酸酶具有抑制作用 , 有美白功能。

    微波辅助提取技术是天然产物提取中一种非常有

    发展潜力的新型技术[2～4 ]。实验采用微波辅助提取当

    归美白成分 , 重点考察了液料质量比、提取时间、提

    取溶剂浓度和微波功率等因素对提取效果及提取物对

    酪氨酸酶抑制率的影响。

    1 实验

    111 材料和仪器

    当归, 购于广州清平药材专业市场 , 干燥、粉碎

    后制成当归粉; 酪氨酸酶 , Sigma 公司; L - 酪氨酸 ,上海捷生科技发展有限公司; 体积分数为 95 %的乙

    醇 , 分析纯。T - 100 电子天平 , 美国双杰兄弟有限

    公司 , 精度0101 g ; BS210S电子分析天平 , 北京赛多

    利斯天平有限公司; RE - 52A旋转蒸发器 , 上海亚荣

    生化仪器厂; QW- HU微波 - 超声波萃取器 , 广州科

    威微波能有限公司; UV - 120 紫外可见分光光度计 ,日本岛津。

    112 微波辅助提取当归美白成分

    称取20 g当归粉 ,用石油醚脱脂后 ,晾干 ,加入乙

    醇 ,静置 10 min 以润湿物料 ,微波辐射 1 min ,间隔

    1 min 后再辐射1 min ,如此间隔辐射直至总时间达到

    实验值 ,过滤。按同样条件重复提取 1 次。合并提取

    液 ,加入3 g活性炭 ,搅拌 15 min 以脱色 ,过滤。滤液

    用旋转蒸发仪真空浓缩至膏状后 ,真空干燥即得到提

    取物浸膏。按下式计算提取物浸膏产率( Y) 。

    Y =

    每次实验得到提取物浸膏的量 (g)

    每次实验称取当归的量 (g)

    × 100 %

    113 酪氨酸酶活性的测定

    以L - 酪氨酸为底物 , 按文献[5 , 6 ]报道的方法

    进行酪氨酸酶的活性测定。先将提取物浸膏用蒸馏水

    溶解 , 制成质量浓度为1 mg mL 的提取物溶液。按表

    1准确吸取提取物溶液、磷酸盐缓冲溶液 (pH 618)

    和质量分数为011 % L - 酪氨酸溶液 , 充分混合 , 于

    35 ℃孵 育 10 min 后 , 加 入 酪 氨 酸 酶 溶 液

    (150 U mL) , 再在 35 ℃下孵育 10 min , 迅速将反应

    液转移至比色皿中 , 在475 nm处测吸光度。

    表1 反应液的组成

    Tab11 Composition of reacting liquor

    反应液 1组 2组 3组 4组

    1 mg mL提取物溶液 mL 110 110

    pH 618缓冲溶液 mL 210 215 110 115

    011 %L - 酪氨酸溶液 mL 110 110 110 110

    酪氨酸酶溶液 mL 015 015

    总体积 mL 315 315 315 315

    利用各组吸光度 , 通过下式计算提取物对酪氨酸

    · 533 ·

    第34卷第5期

    2004年10月 日 用 化 学 工 业 China Surfactant Detergent Cosmetics

    Vo1. 34 No. 5

    Oct . 2004

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.酶的相对抑制率 I (简称抑制率 , 下同) 。

    I =

    ( A1 - A2) - ( A3 - A4)

    A1 - A2

    × 100 %

    式中 A1、 A2、 A3、 A4 分别为1组～4组溶液的吸光度。

    2 结果与讨论

    211 乙醇体积分数对当归提取效果的影响

    用体积分数分别为 50 %、60 %、70 %、80 %、90 %、95 %的乙醇为提取剂 , 按乙醇与当归粉质量

    比(简称液料质量比 ,下同)为 8∶ 1 ,微波功率 450 W提

    取5 min ,重复提取2次 ......