少。

    2. 4. 4 树脂洗脱量的确定:取样品 30 mL ,加至已处理好的

    X型树脂上 ,先用蒸馏水洗至 Molish反应呈阴性 ,以 300 mL

    60 %乙醇洗脱 ,每 30 mL 收集 1 次 ,药液定容。检测芍药苷

    及白芍总苷。结果见表2。

    表2 树脂洗脱量的考察实验

    洗脱倍数 2 4 6 8 10

    芍药苷所占比例 71. 02 95. 49 98. 99 99. 80 100

    TGP所占比例 73. 14 94. 56 98. 12 99. 36 100

    结果显示 ,用 60 %乙醇 6 倍量即可洗脱 98 %以上的芍

    药苷及白芍总苷。

    2. 4. 5 树脂吸附洗脱验证实验

    在前述实验基础上 ,取样品 100 mL ,加至已处理好的 X

    型树脂上 ,先用蒸馏水洗至 Molish 反应呈阴性 ,以 180 mL

    60 %乙醇洗脱 ,回收乙醇 ,减压干燥 ,检测。结果见表3。

    表3 树脂吸附洗脱验证实验( n = 3)

    项目 总固物

    (g)

    芍药苷

    量(g)

    芍药苷含

    量( %)

    白芍总苷

    量(g)

    白芍总苷

    含量( %)

    上柱前 15. 84 2. 05 12. 94 4. 09 25. 8

    上柱后 4. 78 1. 44 30. 13 2. 87 60. 04

    保留率 30. 18 70. 24 70. 17

    表 3 结果显示 ,以 X型大孔吸附树脂柱前后的总固物、芍药苷、白芍总苷含量为指标 ,大孔吸附树脂法可以有效地

    去除杂质 ,使白芍中的芍药苷和白芍总苷的含量大幅度提

    高 ,而且白芍中的芍药苷和白芍总苷的保留率在 70 %以上 ,说明 X型大孔吸附树脂可用于白芍中芍药苷及白芍总苷的

    分离。

    3 讨论

    3. 1 本实验比较了4种大孔吸附树脂对白芍提取液的分离

    效果 ,最后选用X型大孔吸附树脂分离纯化。使用其分离白

    芍提取液连续20次后 ,发现其吸附率只下降10 %(大孔吸附

    树脂的吸附率下降 30 % ,即不能再使用) ,再生后其吸附率

    可明显上升。

    3. 2 芍药总苷是白芍中镇静、镇痛、抗炎、保肝活性成分 ,性

    质较稳定。本实验发现芍药苷检测时在低浓度乙醇中溶解

    较好;白芍总苷水解后 ,供试品溶液应调至中性 ,再进行上

    样 ,各成分分离效果好。

    3. 3 采用本实验工艺条件 ,白芍中芍药苷及总苷可较好地

    提取分离 ,其含量完全可达到中药新药 5 类的要求;本实验

    提取分离条件方法可靠 ,成本较低 ,完全可进行工业化大生

    产。

    参考文献:

    [1 ] 中华人民共和国药典一部[ S] . 北京:科学工业出版社,2000 :

    78.

    [2 ] 金继曙,都述虎,种明才.用大孔吸附树脂分离白芍总甙[J ] .中

    加中药杂志,1994 ,19(4) :31.

    [3 ] 刘玉红,陈燕,易进海. HPLC测定白芍总苷的含量[J ] . 华西药

    学杂志,2002 ,17(4) :2952296.

    正交实验法优选紫草的提取工艺

    杨秀芳

    (陕西科技大学化学化工学院 ,陕西 咸阳 712081)

    收稿日期:2003212205

    作者简介:杨秀芳(1963～) ,女,副教授,从事天然药物的提取与开发。

    关键词:紫草;提取工艺;正交实验

    中图分类号:R284. 2 文献标识码:B 文章编号:100121528 (2005) 0320351202

    紫草为紫草科植物新疆紫草 Arnebia euchroma (Royle) 、紫

    草 Lithosper 2mumerythrorhizon Sieb. et Zucc.或内蒙紫草 Arnebia

    guttata Bunge.的干燥根。分布于东北、河北、河南、新疆、内

    蒙等地。紫草具有凉血、活血、消炎、止痛、解毒、透疹之功

    效 ,用于血热毒盛、斑疹紫黑、麻疹不透、疮疡、湿疹、水火烫

    伤。紫草中药的主要成分为萘醌类色素 ,主要有乙酰紫草

    素、紫草素等。本实验采用正交实验法 ,以左旋紫草为指标 ,优选出紫草醇提取的工艺条件 ,该方法简单、快速、准确 ,为

    紫草有效部位制备与生产提供了参考。

    1 仪器与试药

    1. 1 仪器

    Waters高效色谱仪 ,METTLER2AE240 型电子分析天平 ,CX 2250型超声清洗器。

    1. 2 试药

    苯(AR) ,无水乙醇 ,麻油(d :0. 971～0. 923 g· mL - 1) ;试

    验用药材(购买于西安市药材市场) ;左旋紫草素对照品(中

    国药品生物制剂品检定所) 。

    2 方法与结果

    2. 1 紫草测定方法的建立

    2. 1. 1 色谱条件 色谱柱:Shim2pack CLC 2ODS柱(6. 0 mm×

    153

    2005年3月

    第27卷 第3期

    中 成 药

    Chinese Traditional Patent Medicine

    March 2005

    Vol . 27 No. 3

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.150 mm) ;流动相:甲醇20. 025 mol· L - 1

    磷酸(85∶ 15) ;柱温:25

    ℃;流速:1. 0 mL· min

    - 1

    ,测定15 min后改为1. 5 mL· min

    - 1;测

    定波长:515 nm。

    2. 1. 2 标准曲线的制作 精密称取左旋紫草素对照品 5

    mg ,置100 mL量瓶中 ,加氯仿稀释至刻度 ,摇匀 ,分别精密移

    取1 ,2 ,3 ,4 ,5 mL于10 mL量瓶中 ,加氯仿稀释至刻度 ,摇匀 ,在515 nm处测定吸光度 ,以吸光度与左旋紫草浓度回归 ,得

    回归方程为: Y = - 0. 0047 + 25. 025 X ( r = 0. 9994) ,线性范围

    为5～25 mg· L - 1 ......