中药大黄抗新城疫病毒的试验研究

    于海, 刘玉洁, 常维山

    (山东农业大学动物科技学院, 泰安 271018)

    摘要: 中药大黄具有抗菌、抗病毒、清热、滋阴凉血等作用。大黄的有效成分经乙醇提取, 然后在鸡胚上研究其抗新城疫病

    毒的作用。结果表明, 中药大黄提取液对新城疫F48E8 毒株具有显著的抑制作用。

    关键词: 大黄; 新城疫病毒; 血凝; 鸡胚半数感染量

    中图分类号: S852. 65+

    9. 5 文献标识码:B 文章编号: 167127236 (2005) 0120050202

    新城疫也称亚洲鸡瘟或伪鸡瘟, 是由新城疫病

    毒(new cast le disease viru s,NDV )引起的急性高度

    传染性疾病。该病严重危害养鸡业的发展, 目前尚无

    有效的治疗方法, 国内外均采用疫苗免疫接种进行

    预防(蔡宝祥, 1991)。近年来, 广大科技人员开展了

    大量关于中草药抗病毒和促进机体免疫功能的研

    究, 取得了可喜的成果; 中草药在畜禽疫病的防治上

    也越来越受到人们的重视, 并已显示出其独特的优

    势。大黄作为常用中药, 具有泻下、抗菌、抗病毒、导

    滞通便、利水通淋、舒肝利胆、积滞腹痛, 抗肿瘤、消

    炎、止血、止吐、止痛等多方面的功效, 因此成为人们

    的研究热点之一。大黄的化学成分主要是蒽醌类, 其

    中大黄素的含量较高, 而大黄素具有抗病毒、抗肿瘤

    的作用(王浴生等, 1998; 张为民等, 2002; 唐雪明等,1998; 邓桦等, 2001)。由此看来, 大黄很有可能成为

    一种很有发展前景的抗病毒药物。

    1 材料

    1 . 1 大黄 购于泰安市永春堂大药店。

    1 . 2 病毒 新城疫F48E8 毒株, 由山东省畜牧局动

    物疾病诊断中心田夫林老师惠赠。

    1 . 3 鸡胚 9～ 11 日龄鸡胚购于东岳种禽有限

    公司。

    2 方法

    收稿日期: 2004205214

    2 . 1 大黄醇提取液及其成分鉴定 称取大黄根

    50 g, 切碎, 用95%的乙醇浸泡过夜, 加热提取2 次,每次 2 h, 合并提取液, 减压浓缩, 在无菌条件下自

    然挥发至干, 用生理盐水配成 100 m l (浓度为

    100 m g? m l)的溶液。少许提取液滴在干净滤纸上,待自然挥发至干时, 滴入 10%的N aOH 溶液, 滤纸

    变紫红色, 证明提取物是蒽醌类。最后以 0. 22 L m

    滤膜过滤除菌, 220℃冻存待用(王凡等, 1996; 蒋岩

    等, 1998)。

    2 . 2 病毒毒力(E ID50 ) 的测定 将病毒(新城疫

    F48E8毒株)液依次作 10 倍稀释, 进行鸡胚尿囊腔接

    种, 每个稀释度接种 0. 2 m l, 设 9 个重复, 同时设正

    常鸡胚对照。置37℃孵化48 h, 弃去24 h 内死亡胚,收获24 h 后死亡胚及48 h 活胚的尿囊液, 进行HA

    价的测定。

    2 . 3 药物的毒性试验 将大黄提取液依次作 2 倍

    稀释, 每个稀释度于尿囊腔注射 0. 2 m l, 设 9 个重

    复。置37℃孵化120 h, 定时观察鸡胚有无死亡及异

    常变化。

    2 . 4 药物的抗病毒试验

    2 . 4 . 1 药物的预防试验 将大黄提取液依次作适

    当倍数的稀释, 每个稀释度于尿囊腔注射 0. 2 m l,设9 个重复。置37℃孵化器60 m in 后取出, 每胚于

    尿囊腔接种30E ID50病毒0. 2m l。同时作病毒对照,37℃孵化 48 h, 进行HA 价的测定 ......