离子对色谱法分离氨基醇类对映体

    徐秀珠3

    邹 莉 胡明华 邵保海

    (浙江大学玉泉校区化学系 ,杭州 310027)

    摘 要 运用离子对色谱法 ,以( + )2102樟脑磺酸为手性离子对试剂 ,在二醇柱(Lichrospher 100 2DIOL)

    上 ,分离了苯丙醇胺、美托洛尔、普萘洛尔、肾上腺素和沙丁胺醇5种氨基醇类对映体。考察了流动相组

    成和化合物结构对分离选择性的影响。选用的流动相为二氯甲烷P 正戊醇(97P 3、 VP V、内含 2. 2 ×10

    - 3

    molP L 的樟脑磺酸) ,流速为0. 3 mLP min。苯丙醇胺、美托洛尔、普萘洛尔、肾上腺素和沙丁胺醇对映体的

    分离因子分别为1. 29、 1. 25、 1. 25、 1. 33和1. 29 ;它们的分离度分别为1. 55、 1. 78、 1. 83、 1. 89和1. 78。

    关键词 离子对色谱法 ,苯丙醇胺 ,美托洛尔 ,普萘洛尔 ,肾上腺素 ,沙丁胺醇 ,阿替洛尔 ,对映体分离

    2000212216收稿;2001207223接受

    1 引 言

    许多药物或生理上非常重要的化合物是手性的 ,并且这些化合物的光学异构体在药理上有较大的

    差异 ,在某些情况下 ,其光学异构体也许会产生难以预想的副作用。因此 ,为提高药物活性 ,减少副作用

    以及进行药物生产和质量控制 ,提供光学纯化合物已成为生物化学和药物学的一个重大课题 ,离子对色

    谱法非常适合于氨基醇类离子性化合物的拆分。

    苯丙醇胺、美托洛尔、普萘洛尔、肾上腺素、沙丁胺醇和阿替洛尔属于氨基醇类β 2受体阻滞剂 ,具有

    β 2受体阻滞作用和心脏抑制、局部麻醉作用 ,它们均具有高度的立体选择性。而这些化合物的药理性质

    主要取决于 S 型异构体 ,例如: S 型的普萘洛尔的活性是 R 型的 100 倍,L2型的肾上腺素的血管收缩作

    用要比D2型的强十几倍。因此 ,对β 2受体阻滞剂的拆分具有重要意义。对于上述几种β 2受体阻滞剂的

    拆分大部分是利用手性固定相法(CSP)进行的〔 1～4〕,采用离子对色谱法分离的较为少见〔 5 ,6〕,而国内有关

    报道则还尚未见到。作者以( + )2102樟脑磺酸为手性离子对试剂 ,在二醇柱(Lichrospher 1002DIOL)上 ,以二氯甲烷和正戊醇为流动相分离了上述五种物质。结果表明:分离效果好 ,出峰时间短 ,流动相消耗

    少 ,具有较高的实用价值。

    2 实验部分

    2. 1 仪器与试剂

    液相色谱由 Waters 2690 分离系统、 Waters 996 二极管阵列检测器和 Waters Millennium32

    软件系统组

    成(美国 Waters公司) ;苯丙醇胺、美托洛尔、普萘洛尔、肾上腺素、沙丁胺醇和阿替洛尔均为化学对照品

    (中国药品生物制品检定所) ; ( + )2102樟脑磺酸为分析纯试剂(华东师范大学化工厂) ;其余试剂均为国

    产分析纯试剂 ,其中二氯甲烷用4! 分子筛干燥过。

    2. 2 色谱分离条件

    色谱柱为Lichrospher 1002DIOL (250 ×4. 0 mm i . d. ) ;流动相为二氯甲烷P 正戊醇(内含 2. 2 ×10

    - 3

    molP L 樟脑磺酸) ;柱温为室温;流速为0. 3 mLP min或0. 6 mLP min ;检测波长为225 nm。

    3 结果与讨论

    3. 1 流动相组成对分离选择性的影响

    本实验过程中流动相里极性物质的含量对于分离选择性有着重大的影响 ,我们考察了正戊醇的浓

    度对对映体拆分的影响 ,并且也考察了其它醇类(如异丙醇)和接受氢的试剂(如四氢呋喃和乙酸乙酯)

    第29卷

    2001年11月 分析化学 (FENXI HUAXUE) 研究简报

    Chinese Journal of Analytical Chemistry

    第11期

    1295～1298对拆分的影响 ,其中苯丙醇胺、美托洛尔、肾上腺素和沙丁胺醇的结果列于表1。

    表1 流动相中极性成分对手性分离的影响

    Table 1 Influence of polar components in the mobile phase on chiral separation

    极性成分 Polar component

    体积分数( %)

    Volume fraction

    苯丙醇胺 Norephedrine

    k

    ′ 1 α

    美托洛尔 Metropolol

    k

    ′ 1 α

    肾上腺素 Adrenaline

    k

    ′ 1 α

    沙丁胺醇 Salbutamol

    k

    ′ 1 α

    正戊醇 12Penanol

    2

    3

    5

    1 3

    1. 68

    1. 37

    1. 35

    1. 43

    1. 42

    1. 34

    1. 26

    1. 00

    1. 78

    1. 58

    1. 43

    0. 47

    1. 24

    1. 20

    1. 00

    1. 00

    1. 55

    1. 40

    1. 36

    1. 44

    1. 34

    1. 28

    1. 31

    1. 00

    1. 55

    1. 41

    1. 37

    1. 45

    1. 33

    1. 31

    1. 29

    1. 00

    异丙醇 22Propanol

    2 1. 95 1. 29 1. 94 1. 25 1. 39 1. 31 1. 96 1. 26

    四氢呋喃 Tetrahydrofuran

    2 2. 34 1. 00 2. 27 1. 00 1. 64 1. 00 1. 27 1. 00

    乙酸乙酯 Ethyl acetate

    2 2. 47 1. 00 2. 31 1. 00 1. 62 1. 00 2. 47 1. 00

    k

    ′ 1 . 先洗脱对映体的容量因子(capacity factor of first eluted isomer) ; α.分离因子(separation factor) ,α= k

    ′ 2P k

    ′ 1 ;流速(flow rate) :0. 6 mLP min ;

    3 其中含有0. 35 %的醋酸(containing 0. 35 % CH3COOH in the mobile phase)

    由表1可见 ,随着流动相中正戊醇体积分数的增加 ,容量因子( k

    ′ )均逐渐下降 ......