辣根过氧化酶溶胶2凝胶膜修饰电极与过氧化氢的安培检测

    王宗花1 ,2

    刘 军1

    李清文1

    罗国安3 1

    1

    (清华大学化学系 ,北京 100084) 2

    (青岛大学化学系 , 青岛 266071)

    2001201221收稿;2001208220接受

    1 引 言

    溶胶2凝胶法一般是以金属盐或半金属盐做前驱体(硅酸甲酯 TMOS、硅酸乙酯 TEOS、钛酸丁酯等)在水、互溶剂及催

    化剂的存在下发生水解和缩聚反应 ,形成 SiO2 三维网络结构。在成胶的过程中 ,若引入掺杂组分 ,可将其包埋于三维网

    络结构中。以二氧化硅作为传感器的工作平台 ,其优点在于它具有良好的坚固性、化学惰性、高的光稳定性和透过性 ,同

    时溶胶凝胶过程还具有纯度高 ,均匀性强 ,反应条件易于控制并易于实现多种产品构型等优点 ,可为各种类型生物传感

    器的开发和制作提供更多的机会和条件。

    辣根过氧化酶(HRP)是一种应用较广泛的酶制剂 ,可用于测定 H2O2 的含量。HRP酶电极的制备已有几种途径 ,如

    以单分子自组装膜将酶固定在金电极上、将酶与介体氰基铁酸钾共同吸附在石墨箔电极上、用共价结合法将 HRP和二

    茂铁介质固定在玻碳电极等。作者采用溶胶凝胶法固定 HRP酶 ,以对2苯二酚做电子媒介体 ,考察了 HRP电极对 H2O2

    氧化还原过程的催化效应 ,并在此基础上对过氧化氢进行了测定。

    2 实验部分

    2. 1 仪器与试剂 CHI600电化学分析仪 ,三电极系统(CHI公司) 。正硅酸乙酯(TEOS) (北京化学试剂公司) ,Triton X 2

    100 ,HRP(Sigma公司) 。

    2. 2 硅溶胶2凝胶的制备及酶的固定 实验中采用以下制备方法:在小烧杯中 ,依次加入 1 mL TEOS、 0. 2 mL 乙醇、 30μ L

    1∶ 20的 HCl、 500μ L 水 ,放入超声清洗仪中超声半小时 ,使溶液完全澄清 ......