小鼠Wnt3a基因的克隆、测序与真核表达载体的构建
基因克隆,,Wnt3a;基因克隆;载体,1材料和方法,2结果,3讨论,【参考文献】
【关键词】Wnt3a;基因克隆;载体1材料和方法
1.1材料
KM小鼠,孕13.5 d,安徽省实验动物中心提供. 大肠杆菌JM109由安徽医科大学分子生物学教研室提供. Trizol试剂盒、pSecTag2/Hygro B质粒(Invitrogen). 质粒小量提取试剂盒、 RTPCR试剂盒(Promega);Ex Taq DNA聚合酶、T4 DNA连接酶,DNA Marker, pMD18T Vector,限制性内切酶(TaKaRa).
1.2方法
根据GeneBank报道的小鼠Wnt3a基因序列(X56842),分别设计RT引物及表达引物,并在表达引物的5′端引入XhoⅠ与HindⅢ的识别序列,由上海生工生物工程技术服务有限公司合成. 按Trizol试剂盒说明提取小鼠胚脑总RNA ......
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