热疗作用于肝癌细胞株 SMMC27721

    后几种凋亡相关基因的表达

    王思华,陈小玉,王新朝,吴逸明

    摘 要:目的 探讨热疗前后人肝癌SMMC27721细胞几种凋亡相关基因的表达情况,解释热疗促进肿瘤细胞

    凋亡的分子机制。方法 采用免疫组化S 2P法检测热疗前后肝癌细胞中 P53、 HSP270、 c2Myc 蛋白的表达情况。结

    果 各个热处理组与对照相比,HSP - 70、 P53、 c2Myc 蛋白的表达均增高,有统计学差异( P < 0. 01) ;42℃加热1 h和

    2 h与加热30 min比较 HSP270蛋白的表达增多,有统计学意义( P < 0. 05) ;而 P53和c2Myc 蛋白在各个热处理组间

    表达没有差异。结论 加热可以诱导 HSP70 蛋白的大量产生,可以激活 P53 基因诱导肝癌细胞凋亡,上调 c2Myc

    基因,通过调节细胞凋亡来提高细胞的热敏感性。

    关键词:肝癌细胞;热疗;免疫组化;P53 ;HSP 270 ;c2Myc ;凋亡

    中图分类号:R 454. 5 文献标识码:A 文章编号:1672 - 688X(2005) 01 - 0003 - 04

    Expression of Apoptosis Genes in Human Hepatocelluer Cancer SMMC27721

    Cells after Hyperthermia

    WANG Si2hua , CHEN Xiao2yu , WANG Xin2chao ,et al

    (College of Public Health , Zhengzhou University , Zhengzhou 450052 , China)

    Abstract :Objective To investigate the expression of P53 ,heat shock protein 70(HSP - 70) and c2Myc in

    human hepatocelluer cancer SMMC 27721 cells after hyperthermia. Methods P53 ,HSP270 and c2Myc were

    determined in hepatocelluer cancer SMMC 27721 cells by immunohistochemistry. Result The expression of

    P53 ,HSP270 and c2Myc after hyperthermia was higher than that in matched control ( P < 0. 01) . The expression of

    heat shock proteins 70 after heating one hour and heating two hours was higher than that after heating thirty minutes

    ( P < 0. 05) . P53 and C2myc proteins had no difference in each experimental set . Conclusion Hyperthermia

    therapy could enhance HSP70 expression in hepatocelluer cancer cells , activate P53 gene to induce apoptosis ;

    hyperthermia may upgrade c2Myc gene to increase tumour cell’ s heat sensitivity.

    Key words :hepatocelluer cancer ;hyperthermia ;immunohistochemistry ;P53 ;HSP 270 c2Myc ;apoptosis

    肿瘤的加温疗法 (热疗) 已有 100 多年的历

    史[1 ]。肿瘤热疗(Hyperthermia)是继手术、化学治疗、放射治疗和生物治疗后出现的第 5 种肿瘤治疗方

    基金项目:教育部“211”重点资助项目

    收稿日期:2005 - 01 - 11

    作者单位:郑州大学公共卫生学院,河南郑州 450052

    作者简介:王思华(1980 - ) ,女,河南鹤壁人,在读硕士研究生,从事卫

    生毒理学研究工作。

    法 ,在肿瘤的综合治疗中发挥了重要作用[2～3 ]。世

    界各国对热疗这一方法寄予了极大的希望。上世纪

    90年代前后 ,实验研究注意到加温诱发细胞凋亡的

    现象。通过热毁损可以致癌瘤细胞坏死 ,但很多情

    况下 ,热疗的细胞凋亡模型更接近实际情况[4 ]。细

    胞凋亡是一个复杂的过程 ,与凋亡相关基因的调控

    密切相关。为此 ,我们以肝癌细胞 SMMC27721 为研

    [4] Bolli M,Kocher T,Adamina M,et al . Tissue microarray evaluation of

    Melanoma antigen E (MAGE) tumor2associated antigen expression∶

    potential indications for specific immunotherapy and prognostic

    relevance in squamous cell lung carcinoma[J ] .Ann Surg ,2002 ,236

    (6)∶ 785～793.

    [5] Cai S , Zhao H,Leng X, et al . Melanoma antigen23 expression in

    human hepatocellular carcinoma [ J ] . National Surgical Journal of

    China ,2000 ,38 (9)∶ 693～696.

    [6] Jang SJ ,Soria JC ,Wang L ,et al . Activation of Melanoma Antigen

    Tumor Antigens Occurs Early in Lung Carcinogenesis [ J ] . Cancer

    Research ,2001 ,61∶ 7959～7963.

    [7] Sigalotti L ,Coral S ,Nardi G,et al . Promoter methylation controls the

    expression of MAGE2 ,3 and 4 genes in human cutaneousMelanoma[J ] .

    J Immunother ,2002 ,25(1)∶ 16～26.

    · 3 · 河南科技大学学报(医学版) 2005年3月 第23卷 第1期

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.究对象 ,用免疫细胞化学技术来检测几种凋亡相关

    基因在热疗前后的变化 ,以期探讨其在凋亡过程中

    的作用 ,解释热疗促进凋亡的分子机制。

    1 材料与方法

    1. 1 材料 细胞株: SMMC27721 人肝癌细胞株 ,由

    上海中科院细胞库提供。试剂:RPMI1640 培养基为

    GIBCO产品。P53、 HSP270、 c2Myc 鼠抗人 IgG一抗来

    自美国 SANT CRUTZ公司 ,3 ,3′二氨基联苯胺(DAB)

    和过氧化物酶标记的链霉卵白素染色试剂盒(S 2P试

    剂盒)以及多聚赖氨酸处理的载玻片为北京中山公

    司的产品 ......