摘 要: 综述了近年来应用偶氮类显色剂测定生物样品中铜、锌、铁的光度分析发展状况，从吡啶偶氮类试剂、咪唑偶氮类试剂以及三氮唑偶氮类试剂加以归纳，引用文献44篇。 关键词: 光度分析;生物样品;微量元素;偶氮类显色剂;综述 可见分光光度法是测定微量元素的一种重要方法，其原理是根据微量元素与各种显色剂形成配合物产生一定的吸光度，再根据吸光度的大小实现对微量元素的定量。其方法简便、快速，且仪器价格较低。近年来，随着各种新显色剂的不断开发和应用，以及表面活性剂对显色反应的增效作用，使吸光光度法得到了更加广泛的应用。杂环偶氮类显色剂是光度分析中一类典型、也应用较广的显色剂，主要有吡啶偶氮类试剂、咪唑偶氮类试剂以及三氮唑偶氮类试剂。本文就近年来国内外发表的应用这些显色剂测定血清铜、锌、铁的分光光度法文献作一简单总结。

     1 吡啶偶氮类试剂

    在杂环偶氮类试剂的吡啶环上引入卤素等取代基时，可引起显色反应，其中2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-乙氨基酚(5-Br-PADAP)的应用最引人注目，它广泛应用于光度、色谱和电化学等分析中。用5-Br-PADAP分析不同的生物样品时，由于生物样品本身性质的差异，测定时选取的具体条件不尽相同。当5-Br-PADAP用于血清铜 [1] 、铁 [2] 含量测定时，多选取pH4.0HAc-NaAC的缓冲液为反应介质，因为在pH9左右的缓冲介质中，测定的干扰多，显色线性范围小，且血清铜、铁的解离速度慢，因此选择pH4.0的酸度 [1～2] 。与血清铜、铁测定方法所不同的是，在测定体系中有血清锌解离剂存在的情况下，血清锌在pH8.0Tris-HCl缓冲液中即可从血清蛋白中裂解开来，并与5-Br-PADAP发生灵敏的显色反应 [3] 。在建立的这些方法 [1～3] 的基础上，连国军等 [4～6] 报道了以5-Br-PADAP为显色剂的血清铜、锌、铁自动化测定试剂盒。临床应用表明，这些试剂盒的各项方法学指标满足临床需要，存在的一个最大问题是5-Br-PADAP对全自动生化分析仪的管道污染问题。5-Br-PADAP从结构上看是一个醇溶性的偶氮类显色剂 [6] ，需要在乙醇、非离子表面活性剂存在下才具有良好的溶解性，因此，如何在5-Br-PADAP的分子结构中引入水溶性基团或采用其他水溶性的灵敏显色剂成为发展血清铜、锌、铁自动化检测方法学及试剂盒的关键。

    不同作者报道了以不同的水溶性染料作显色剂测定血清铜、锌、铁。连国军等在5-Br-PADAP分子结构中引入水溶性的—COOH合成了2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-(N ......