灵芝，通常称为灵芝草，为多孔菌科紫芝或赤芝的全株，在祖国医学中被列为上品药材[1]。它含有多种有用的成分，如三萜类、多糖、麦角甾醇、葡萄糖氨、生物碱、水溶性蛋白质、顺蓖麻酸、延胡醇和黄酮类等生物活性物质。具有滋补强身、安神止痛等多种功效。本实验选择一种肝癌细胞，着重研究其作用的诸多方面，包括细胞生长、凋亡的诱导作用等。

     1 材料与方法

    1.1 材料 双灵固本散由上海绿谷(集团)公司生物医药研究所提供。该产品是由赤芝全草(ganoderma lucidum karst)和多种辅料经上海绿谷(集团)公司生物医药研究所特殊萃取加工而成；肝癌细胞BEL-7402、BEL-7404由中科院细胞所提供，1640完全培养液(Bibgo公司+卡那霉素+青霉素+链霉素+10%小牛血清)，37℃，5%CO2进行培养；TS和CX引物由上海生工公司合成；Taq酶、dNTP由上海生工公司购入供给；PCR仪为GeneTchne公司。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞生长抑制测定[2，3] 细胞(浓度104)接种于96孔培养板，每孔90μl。实验分5组进行，每组设3个复孔，第一组为无药物对照组，其他四组为不同药物浓度组。将双灵固本散粉剂用培养液溶解稀释成1mg/ml、5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml四个浓度加入4组的药物组，每孔10μl。37℃、5%CO2条件作用72h后，D-Hank′s液洗涤2次，每孔加100μl含0.2mg/ml MTT的D-Hank′s液，37℃温育4h，去除MTT液，加200μl碱化DMSO(90% DMSO,0.1mol/L甘氨酸-NaOH,pH10.0) ......