弓形虫ROP2基因的克隆及原核表达
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参见附件。
应用PCR技术从刚地弓形虫( Toxoplasma gondii )RH株的基因组DNA中扩增编码ROP2(rhpotry protein 2)的部分基因，构建pGEX-KG-ROP2重组表达质粒，经酶切、PCR及DNA测序鉴定后，将阳性质粒转入E.coliBL21CodonPlus中在IPTG诱导下表达，表达产物用SDS-PAGE和Western-blot分析鉴定。结果表明，扩增的ROP2基因与GenBank上发表的相应基因序列的同源性达99.9 %，该基因可以在大肠杆菌中高效表达，表达的ROP2融合蛋白表观分子量约为64 KD，可被兔抗弓形虫免疫血清识别。本研究为下一步利用重组蛋白研制弓形虫病的诊断试剂盒和基因工程疫苗奠定基础。
应用PCR技术从刚地弓形虫( Toxoplasma gondii )RH株的基因组DNA中扩增编码ROP2(rhpotry protein 2)的部分基因，构建pGEX-KG-ROP2重组表达质粒，经酶切、PCR及DNA测序鉴定后，将阳性质粒转入E.coliBL21CodonPlus中在IPTG诱导下表达，表达产物用SDS-PAGE和Western-blot分析鉴定。结果表明，扩增的ROP2基因与GenBank上发表的相应基因序列的同源性达99.9 %，该基因可以在大肠杆菌中高效表达，表达的ROP2融合蛋白表观分子量约为64 KD，可被兔抗弓形虫免疫血清识别。本研究为下一步利用重组蛋白研制弓形虫病的诊断试剂盒和基因工程疫苗奠定基础。
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