腺病毒加载的RNAi逆转BCRP介导的非典型MDR的研究
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参见附件。
目的 采用RNAi的方法逆转乳腺癌耐药蛋白介导的非典型多药耐药。方法 建立能够表达BCRP的细胞系MCF-7/MX80，构建干扰BCRP mRNA的腺病毒载体。将干扰载体感染耐药细胞后，采用细胞毒性实验、米托蒽醌外排实验、荧光定量PCR、Western blot等方法检测对BCRP介导的多药耐药逆转的作用。结果 将构建的腺病毒干扰载体感染耐药细胞后，耐药细胞对米托蒽醌的耐药指数从978降低至75；外排米托蒽醌的能力显著降低，感染和未感染pAd-BCRP的MCF-7/MX80细胞外排1小时后细胞内的米托蒽醌的荧光强度分别为56.4和12.8。感染24小时后，荧光定量PCR结果显示细胞中BCRP mRNA的水平就出现明显的降低，4周后未出现回升；Western blot结果显示，干扰后的耐药细胞表达BCRP的量显著降低。结论 构建的腺病毒干扰载体能显著逆转BCRP介导的非典型MDR。
目的 采用RNAi的方法逆转乳腺癌耐药蛋白介导的非典型多药耐药。方法 建立能够表达BCRP的细胞系MCF-7/MX80，构建干扰BCRP mRNA的腺病毒载体。将干扰载体感染耐药细胞后，采用细胞毒性实验、米托蒽醌外排实验、荧光定量PCR、Western blot等方法检测对BCRP介导的多药耐药逆转的作用。结果 将构建的腺病毒干扰载体感染耐药细胞后，耐药细胞对米托蒽醌的耐药指数从978降低至75；外排米托蒽醌的能力显著降低，感染和未感染pAd-BCRP的MCF-7/MX80细胞外排1小时后细胞内的米托蒽醌的荧光强度分别为56.4和12.8。感染24小时后，荧光定量PCR结果显示细胞中BCRP mRNA的水平就出现明显的降低，4周后未出现回升；Western blot结果显示，干扰后的耐药细胞表达BCRP的量显著降低。结论 构建的腺病毒干扰载体能显著逆转BCRP介导的非典型MDR。
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