弓首蛔虫种特异PCR鉴定方法的研究
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参见附件。
根据已报道的弓首属和弓蛔属蛔虫核糖体DNA(rDNA)第1和第2内转录间隔区(ITS-1和ITS-2)核苷酸序列，分别设计出针对犬弓首蛔虫、猫弓首蛔虫、马来亚弓首蛔虫和狮弓蛔虫的种特异上游引物，下游引物采用保守引物NC2，对这四种蛔虫的总DNA分别进行PCR扩增，以期对这四种蛔虫在分子水平上进行种特异分类鉴定。结果显示，四对引物在特定PCR条件下可以特异性地扩增出四种蛔虫rDNA中ITS-1和ITS-2部分序列，且无交叉反应。在敏感性方面，犬弓首蛔虫特异PCR可以检测到总DNA最低浓度为0.14ng/μl；猫弓首蛔虫、马来亚弓首蛔虫和狮弓蛔虫分别可以检测到0.54ng/μl、0.38ng/μl和0.13ng/μl。本试验初步建立了用于弓首蛔虫分子鉴定的特异PCR方法，这种方法可用于组织中弓首蛔虫的检测，从而为弓首蛔虫幼虫移行症的诊断奠定了基础。
根据已报道的弓首属和弓蛔属蛔虫核糖体DNA(rDNA)第1和第2内转录间隔区(ITS-1和ITS-2)核苷酸序列，分别设计出针对犬弓首蛔虫、猫弓首蛔虫、马来亚弓首蛔虫和狮弓蛔虫的种特异上游引物，下游引物采用保守引物NC2，对这四种蛔虫的总DNA分别进行PCR扩增，以期对这四种蛔虫在分子水平上进行种特异分类鉴定。结果显示，四对引物在特定PCR条件下可以特异性地扩增出四种蛔虫rDNA中ITS-1和ITS-2部分序列，且无交叉反应。在敏感性方面，犬弓首蛔虫特异PCR可以检测到总DNA最低浓度为0.14ng/μl；猫弓首蛔虫、马来亚弓首蛔虫和狮弓蛔虫分别可以检测到0.54ng/μl、0.38ng/μl和0.13ng/μl。本试验初步建立了用于弓首蛔虫分子鉴定的特异PCR方法，这种方法可用于组织中弓首蛔虫的检测，从而为弓首蛔虫幼虫移行症的诊断奠定了基础。
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