VEGF165基因转染大鼠骨髓基质细胞的实验研究
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目的 探讨对大鼠骨髓基质细胞进行重组人血管内皮细胞生长因子165基因修饰的可行性。方法 采用全骨髓细胞贴壁培养法获得稳定的大鼠骨髓基质细胞,分别在脂质体LipofectMINE2000和新型的阳离子聚合物Sofast介导下行pcDNA3.1-VEGF165转染骨髓基质细胞,在倒置显微镜下观察转染后细胞形态和生长情况的变化,通过免疫细胞化学鉴定VEGF在细胞中的表达情况。结果 免疫细胞化学证实两种方法均能成功地将人血管内皮细胞生长因子165基因转染至大鼠骨髓基质细胞中,并获得一定的表达。新型的阳离子聚合物Sofast的细胞毒性略小于传统的脂质体。结论 真核表达载体pcDNA3.1-VEGF165可以成功地在骨髓基质细胞中表达,为进一步探讨组织工程血管化的研究奠定了初步的实验基础。
目的 探讨对大鼠骨髓基质细胞进行重组人血管内皮细胞生长因子165基因修饰的可行性。方法 采用全骨髓细胞贴壁培养法获得稳定的大鼠骨髓基质细胞,分别在脂质体LipofectMINE2000和新型的阳离子聚合物Sofast介导下行pcDNA3.1-VEGF165转染骨髓基质细胞,在倒置显微镜下观察转染后细胞形态和生长情况的变化,通过免疫细胞化学鉴定VEGF在细胞中的表达情况。结果 免疫细胞化学证实两种方法均能成功地将人血管内皮细胞生长因子165基因转染至大鼠骨髓基质细胞中,并获得一定的表达。新型的阳离子聚合物Sofast的细胞毒性略小于传统的脂质体。结论 真核表达载体pcDNA3.1-VEGF165可以成功地在骨髓基质细胞中表达,为进一步探讨组织工程血管化的研究奠定了初步的实验基础。
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