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编号:10978907
脑还丹对Aβ诱导的海马神经元损害的抑制作用
http://www.100md.com 《广州中医药大学学报》 2004年第3期
中药复方脑还丹,,阿尔茨海默病,中药疗法;淀粉挥β蛋白;神经元,药物作用,细胞,培养的,1材料与方法,2结果,3讨论,参考文献
     摘要:【目的】探讨中药复方脑还丹对Aβ诱导的海马神经元损害的保护作用。【方法】采用MTT法及NSE免疫组化方法观察脑还丹含药血清对经Aβ25-35处理的原代培养的新生大鼠海马神经元的影响。【结果】体外培养的新生大鼠海马神经元经Aβ25-35处理后,活细胞数减少,而脑还丹含药血清能够促进神经元的存活率以及促进神经元的生长发育,与对照组比较有显著性差异(P<005)。【结论】脑还丹能够减轻Aβ对海马神经元的毒性作用。

    关键词:阿尔茨海默病/中药疗法;淀粉挥β蛋白;神经元/药物作用,细胞,培养的

    老年性痴呆,即阿尔彩默病(Alzheimer s Disease AD),是引起痴呆最常见的进行性退行性神经病。临床表现以认知功能减退为主,病理学特征包括神经元丢失、神经元纤维缠结(NFT)、老年斑(SP)和淀粉样血管病变等。β-淀粉样蛋白(Aβ)是AD病人老年斑中的主要成分,许多研究表明Aβ与AD发病有关[1-4]。因此,保护神经元免受Aβ的神经毒性可能是防治AD的有效手段之一。笔者在具有抗老防衰作用的古方“草还丹”的基础上总结了自己长期的临床实践经验,以骨碎补、熟地、菖蒲等组方“脑还丹”,该方具有补肾填精、活血通络、涤痰开窍、平衡阴阳的功效,初步研究表明,“脑还丹”对老年性痴呆患者及痴呆动物具有一定的疗效[5-7]。我们通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法、神经元特异性稀醇化酶(NSE)免疫组织化学方法以了解脑还丹对Aβ诱导神经元损害的保护作用,为脑还丹防治老年性痴呆进一步提供实验依据。

    1材料与方法

    11 试剂

    DMEM/F12培养基、小牛血清均由Gibco公司提供;Aβ25~35、多聚赖氨酸、MTT均由Sigma公司提供;NSE免疫组化试剂盒、NSEⅠ抗均由博士德公司提供;二甲基甲矾(DMSO)Dhanks,胰蛋白酶,磷酸缓冲液(PBS),40g/L多聚甲醛等。

    12 仪器

    倒置显微镜、超净工作台(江苏苏净BHC-1300ⅡA/B3型);二氧化碳培养箱(德国Heraeus P63450 Hanau型);培养板(美国Orange公司);酶联免疫分析仪(Wellscan MK3型);全自动图像处理系统(德国KONTRON IBAS20型) ......

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