溶菌酶分离纯化方法的研究新进展
溶菌酶,,溶菌酶;膜色谱法;亲和沉淀法；扩张床吸附法,1离子交换法(Ionexchangechromatography),2膜色谱技术(Membranechro
摘 要 对近年来最新的溶菌酶分离纯化的方法，如包括膜色谱法、超滤法、反胶团萃取法、IMAC、亲和沉淀及扩张床吸附法等进行了总结。关键词 溶菌酶;膜色谱法;亲和沉淀法；扩张床吸附法
溶菌酶(lysozyme)是一种专门作用于微生物细胞壁的水解酶，又称胞壁质酶(muramidase)。人们对溶菌酶的研究始于上世纪初，英国细菌学家Fleming在发现青霉素的前6年(1922年)发现人的唾液、眼泪中存在能溶解细菌细胞壁的酶，因其具有溶菌作用，故命名为溶菌酶，其中鸡蛋溶菌酶的研究和应用已相当深入和广泛[1]。随着各种新的生物分离技术的出现，用于溶菌酶分离纯化的方法也愈来愈多，从最初的直接结晶法，沉淀法到亲和色谱法、离子交换法，特别是现在采用的新技术如亲和膜色谱、反胶团萃取、双水相萃取[2]、亲和沉淀等。本文就近年来的一些分离纯化方法进行综述。
1 离子交换法(Ionexchange chromatography)
离子交换法是利用溶液中各种带电粒子与离子交换剂之间结合力的差异进行物质分离的操作技术，由于具有简便、高效、成本低，且可自动化连续操作的优点，因此一直以来都是溶菌酶生产所常用的方法。常用的离子交换剂有Duolite-464、羧酸纤维素(PC)、羧甲基纤维素(CMC)和羧甲基琼脂糖等。Li Chang等[3]用Duolite-464从性质均一的蛋清溶液中分离溶菌酶，建立的一种简便而有效的工艺过程，可使溶菌酶的回收率高达90-95%。同时采用Duolite-464分离纯化溶菌酶适合于连续自动化操作。Durance等[4]也采用Duolite-464从未被稀释的蛋清溶液中同时分离溶菌酶和抗生素蛋白。林亲录等[5]采用732型树脂纯化溶菌酶，但其得率与酶活都不太理想。同时也有很多科研者使用724型树脂对溶菌酶进行分离纯化。
一般的离子交换剂都具有刚性小、收缩性大、再生手续麻烦，且易被柱堵塞的弊端，而李蓉[6]等采用硅胶基质弱阳离子交换剂XIDACEWCX作为填料制作的色谱分离纯化蛋清中的溶菌酶克服了上述的弊端，获得了良好的分离效果，活性回收率为107%，蛋白的比活为15 467 U/mg，纯化倍数提高了5.6倍。这种方法比传统的软基质离子交换色谱分离法速度快，纯化效率高。Ghosh R[7]采用polyvinylidine fluoride(PVDF)膜从蛋清中纯化溶菌酶，此膜通过离子交换机制选择性地结合溶菌酶，它对大量各种各样的有机溶剂、酸等有抑制作用，能通过加热复性而不改变膜的孔度 ......
您现在查看是摘要页，全文长 13002 字符。