RNAi技术在临床中的运用
肿瘤,,RNA,干涉；siRNA；HIV；乙肝；肿瘤,1RNAi的发生机制,2siRNA在抗病毒感染疾病中的运用,3RNAi在肿瘤治疗中的运用,4展望,参考文献
关键词 RNA 干涉；siRNA；HIV；乙肝；肿瘤RNA 干涉 (RNA interference ,RNAi)现象是指内源性或外源性双链RNA(dsRNA)介导细胞内的mRNA发生特异性降解，导致靶基因的表达沉默，产生相应的功能表型缺失。这一现象属于转录后的基因沉默机制(posttranscriptional gene silencing ,PTGS)。
1998年 Fire[1]和他的同伴在线虫中首次发现RNAi现象以来，陆续有报道在植物和果蝇等其他各种生物中也发现了RNAi现象，但在哺乳动物中，较长的dsRNA因能诱导IFN(干扰素)生成，mRNA能够发生非特异性降解，不存在特异性的RNAi。但在2001年，Tuschi等报道在哺乳动物中也存在RNAi现象，介导RNAi的中间物质是双链小RNA(small interfering RNA ,siRNA),只要dsRNA 短于30 bp，就不会促发干扰素效应，能够特异性的降解靶mRNA，导致基因沉默，这一结果开辟了RNAi现象研究与运用的新领域。
1 RNAi 的发生机制
RNAi 发生的主要过程大致分为3个阶段:①起始阶段,dsRNA在细胞内Dicer均匀切割成21-23nt大小的siRNA。dsRNA 可以是外源的(如病毒RNA 复制中间体或人工导入的dsRNA) ,也可以是内源的(如细胞中单链RNA 在RNA 依赖RNA 聚合酶RdRP 的作用下形成的dsRNA)。siRNA 的长短是种族特异的,5′端是磷酸的,3′端往往突出2 个nt。②扩增阶段,siRNA 与mRNA 靶向性结合,并作为引物,在RdRp 作用下再次形成dsRNA ,dsRNA 又被Dicer切割成siRNA ,新形成的siRNA 又可以进入下一轮循环而达到扩增的目的。③效应阶段, siRNA 和内切核酸以及其他蛋白一起形成RISC (RNAinduced silencing complex)。RISC的核酸部分起到靶向性的作用,蛋白部分则起到降解mRNA 的作用。
研究表明，RNAi可能的作用途径大致可分为2种：一种是以线虫、真菌和植物为代表的RdRp(RNAdependent RNA polymerase)途径。RNAi现象有一个靶RNA大量产生的过程，产生的靶RNA进一步在被称为Dicer的RNase Ⅲ类酶的作用下，生成大量的siRNA，达到有效浓度的siRNA能够起动RNAi机制，降解目标mRNA。另一种途径以果蝇和哺乳动物为代表，外源或内源的双链RNA被Dicer剪切,产生 21-23nt大小的siRNA分子 ......
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